Señalización HGF/MET como diana terapéutica en pacientes con mieloma múltiple

Resumen

El Mieloma Múltiple es una neoplasia de linfocitos B que surge a partir de células plasmáticas que proliferan clonalmente en la médula ósea. El mieloma múltiple continúa siendo un cáncer incurable y se hace necesaria la creación de nuevas estrategias terapéuticas para evitar la recaída de la enfermedad, manejar la resistencia y refractariedad a los tratamientos y aumentar el tiempo hasta la recaída. Las células de mieloma se caracterizan por la expresión en su superficie del antígeno CD138. Entre un 20-30 por ciento de las células de mieloma producen factor de crecimiento hepático (HGF) y por ello su concentración en suero es especialmente elevada en pacientes con mieloma. CD138 presenta unido en sus extremos cadenas de proteoglicanos heparán sulfato favoreciendo la unión de gran cantidad de HGF. HGF también es secretado por células del estroma medular. El ligando del receptor MET es HGF. Ambos son esenciales durante el desarrollo embrionario y la vida postnatal. Sin embargo, se ha demostrado que una activación anómala de MET, debida por ejemplo a sobreexpresión, contribuye al desarrollo y progresión de una gran variedad de cánceres humanos. Así la unión de HGF a MET juega un papel importante en la regulación de las células de mieloma. Adicionalmente, MET puede presentarse como tránscrito alternativo L1-MET. El efecto de L1-MET no ha sido claramente definido. En este trabajo, se analiza la expresión de los tránscritos MET, L1-MET y HGF y se evalúa in vitro e in vivo el tratamiento con Crizotinib y sus combinaciones sinérgicas. Se ha estudiado la expresión de MET, L1-MET y HGF en un total de 68 muestras de pacientes, correlacionando la expresión de dichos tránscritos con los datos de variables clínicas y supervivencia. Se obtuvo sobreexpresión significativa de MET y L1-MET en las muestras de pacientes con mieloma, al diagnóstico y en recaída, que se correspondió con sobreexpresión de HGF. Esta sobreexpresión, no se correlacionó con descenso albúmina, incremento beta2-microglobulina, delP53 y t4;14, ni descenso supervivencia. Las mutaciones en el gen MET se evaluaron mediante secuenciación de última generación. Los resultados mostraron que la sobreexpresión de MET en mieloma no se asociaba a mutaciones activadoras en MET. La sensibilidad a Crizotinib se evaluó empleando el análisis de viabilidad celular con WST-8 y las combinaciones sinérgicas se establecieron calculando el índice de combinación. Se trataron con Crizotinib, células de mieloma y estromales sanas, respondiendo todas al tratamiento. El rango de IC50 fue amplio y variaba en función del nivel de expresión de MET o L1-MET y HGF. La expresión de L1-MET condicionaba mayor expresión de MET. Por el contrario, las células sanas del entorno medular no se afectaban a los valores de IC50 de las células de mieloma. Crizotinib a su vez suprimió el crecimiento de las células clonogénicas. Los fármacos antimieloma Bortezomib y Pomalidomida, describieron comportamiento sinérgico con Crizotinib Las vías de señalización afectadas por el tratamiento de Crizotinib se analizaron mediante Western-blot. El tratamiento con Crizotinib pudo frenar las vías Jak/Stat, Akt/mTOR, MAPK.