Caracterización en fibroblastos de una ruta de invasión de salmonella enterica serovar typhimurium independiente del sistema de secreción tipo III

Resumen

Salmonella enterica serovar Typhimurium es un patógeno intracelular facultativo que invade células no fagocíticas empleando el sistema de secreción tipo III (SSTT) codificado en la isla de patogenicidad 1 (SPI-1). Este patógeno prolifera en células epiteliales mientras que permanece en un estado no proliferativo en otras células no fagocíticas como los fibroblastos. En esta tesis, hemos observado que un mutante en SPI-1 invade fibroblastos. Esta invasión se produce sin cambios dramáticos en el citoesqueleto (membrane ruffling), una alteración característica que acompaña a la entrada bacteriana promovida por el SSTT de SPI-1. La entrada independiente de SPI-1 requiere la fosfoinositol-3-quinasa, activación de la proteína quinasa activada por mitógenos, el metabolismo del ácido araquidónico y de las GTPasas Cdc42 y RhoA. Por otra parte, al igual que la entrada de la estirpe silvestre, la entrada independiente de SPI-1 requiere acumulación de actina, aunque no se observaron cambios dramáticos a nivel de membrana. A diferencia de lo descrito en células epiteliales, la tubulina está implicada tanto en la entrada de la estirpe silvestre como en la del mutante ΔSPI-1 en fibroblastos. Con el objetivo de identificar el ligando bacteriano implicado en la entrada independiente al SPI-1, por medio de estrategias genéticas, se seleccionó un mutante no invasivo: yejM. Este gen codifica una supuesta hidrolasa localizada en membrana interna y tiene un papel importante en la entrada de Salmonella en células no fagocíticas.