Efecto modulador de bifidobacterium pseudocatenulatum cect 7765 sobre la respuesta inflamatoria y la traslocación bacteriana en la cirrosis

Resumen

Antecedentes La traslocación bacteriana (TB) es un fenómeno frecuente en la cirrosis y es considerada el mecanismo por el que se desarrollan complicaciones graves de la enfermedad, tales como la peritonitis bacteriana espontánea (PBE). Los episodios de TB provocan una estimulación mantenida del Sistema Inmune (SI) y desencadenan un estado de inflamación, tanto a nivel intestinal como sistémico. Este estado favorece la progresión de la enfermedad y la aparición de complicaciones relevantes. La intervención sobre la microbiota intestinal, utilizando diferentes cepas bacterianas, se considera una estrategia suplementaria potencial para tratar la cirrosis y sus complicaciones. Objetivos Evaluar los efectos de la cepa Bifidobacterium pseudocatenulatum CECT 7765 (CECT7765) sobre el tejido hepático, la pared intestinal y la tasa de TB en un modelo de cirrosis inducida por tetracloruro de carbono (CCl4); discriminar el mecanismo de interacción entre CECT7765 y los linfocitos intestinales (LIs) utilizando este mismo modelo; y estudiar el efecto de CECT7765 sobre la función de macrógafos (MOs) humanos in vitro. Métodos Se realizaron dos protocolos de inducción de daño hepático experimental por la administración intragástrica de CCl4 durante 12 semanas en ratones. En el primero, los animales recibieron CECT7765 a una concentración de 109 unidades formadoras de colonias (UFC)/día o placebo, y a todos los animales se les administró además Escherichia coli (E.coli) (107 UFC, dosis única) de forma intragástrica 24 horas antes de la laparatomia. En el segundo, recibieron concentraciones crecientes de CECT7765 (107, 109 o 1010 UFC/día) o placebo intragástricamente. En ambos casos, un grupo de animales que no recibieron tratamiento alguno actuaron como controles. En el tercer estudio, se incluyeron 10 pacientes con cirrosis y ascitis y 10 controles sanos. Se aislaron MOs derivados de monocitos (MDM) de sangre periférica y MOs de líquido ascítico (LA) y se estimularon in vitro con factor estimulante de colonias de MOs (M-CSF) (100 ug/ml), lipopolisacárido (LPS) (100 ng/ml) y/o CECT7765 (104 UFC). También se evaluaron células de Kupffer (KCs) procedentes de ratas tratadas con CCl4 y sometidas a ligadura del conducto biliar (BDL). Resultados La tasa de TB y los niveles de endotoxina en suero disminuyeron significativamente en animales tratados con CECT7765, mientras que los marcadores de integridad de la pared intestinal y algunos mediadores anti-inflamatorios en muestras de pared intestinal aumentaron de forma significativa, comparado con animales que solo recibieron CCl4. LIs procedentes de ratones tratados con CECT7765 mostraron una reducción significativa en la expresión de receptores de quimiocinas pro-inflamatorias y una repolarización hacia un perfil anti-inflamatorio. Dicha modulación inflamatoria involucró al receptor tipo Toll (TLR)-2. En estos animales también se observó una reducción en la permeabilidad intestinal, evidenciada por una menor tasa de recuperación de FITC-LPS tras la administración de CECT7765. Por último, la inflamación y la función hepática mejoraron con la administración de CECT7765, aunque sólo a dosis altas (1010 UFC). MDM y MOs procedentes de LA estimulados in vitro con CECT7765 mostraron cambios significativos a nivel morfológico y en la expresión de marcadores de superficie característicos de MOs tipo M2 (CD206, CD163 y CD16) comparados con la estimulación por LPS. El patrón de secreción de citocinas de MDM, MOs de LA y KCs de rata también fue significativamente modulado por la estimulación con CECT7765 comparado con LPS. CECT7765 aumentó la expresión de genes anti-inflamatorios en MOs de LA de pacientes con cirrosis, incluso tras el pretratamiento con LPS. CECT7765 no redujo la capacidad bactericida de los MOs de LA. Conclusiones La administración de CECT7765 se asocia con una mejora en la integridad de la pared intestinal y reduce la TB. Además, mejora la homeostasis intestinal, reduciendo la actividad pro-inflamatoria de los LIs en un modelo experimental de cirrosis. CECT7765 induce una transición morfológica, fenotípica y funcional de MDM de sangre periférica y de MOs de LA de pacientes con cirrosis.