Búsqueda de candidatos proteicos para el desarrollo de vacunas frente a las infecciones por strptococcus suis en cerdos

Resumen

RESUMEN DE LA TESIS DOCTORAL DE Dª LIDIA GÓMEZ GASCÓN El resumen de la tesis para la base de datos Teseo debe ser una presentación de la tesis y tener la extensión suficiente para que quede explicado el argumento de la tesis doctoral. El formato debe facilitar la lectura y comprensión del texto a los usuarios que accedan a Teseo, debiendo diferenciarse las siguientes partes de la tesis: 1. Introducción o motivación de la tesis. Streptococcus suis es microorganismo de enorme repercusión económica para la industria porcina y una marcada importancia sanitaria, al ser considerado un agente zoonósico emergente. En base al polisacárido capsular, se reconoce la existencia de 35 serotipos, siendo los serotipos del 1 al 10, 14, 15, 16, 1/2 y 1/14 los que se asocian a la mayoría de los brotes clínicos en el cerdo y el hombre. El descubrimiento de una vacuna eficaz, elaborada con antígenos comunes y conservados entre serotipos se ha convertido en un objetivo prioritario mundial. Actualmente, la atención se ha desplazado hacia las proteínas de superficie, especialmente aquellas ancladas a la pared celular, que pueden ser detectadas con técnicas proteómicas. 2. Contenido de la investigación. Hemos analizado mediante proteómica una colección de 39 cepas pertenecientes a 19 serotipos, utilizando la técnica del shaving, basada en la digestión de células vivas con proteasas y el posterior análisis de los péptidos generados por LC/MS/MS. Esto nos ha permitido definir el pan-surfoma de este grupo de aislados, identificado un total de 113 proteínas (33 lipoproteínas; 17 proteínas de la pared celular; 9 proteínas secretadas, 28 proteínas de membrana con un dominio transmembrana y 26 proteínas multi-transmembrana). De todas las proteínas identificadas, tres proteínas de pared celular cell envelope proteinase (SSU0757), 5'-nucleotidase (SSU0860) y surface-anchored DNA nuclease o SsnA (SSU1760), podrían ser buenos candidatos vacunales, al estar presentes en más del 70 por ciento de los serotipos y estar más expuestas en la superficie. Seleccionamos la proteína ¿Surface-anchored DNA nuclease¿ (SsnA) para valorar su potencial como candidato vacunal, mediante ensayos de protección in vivo de la proteína recombinante rSsnA. Realizamos un estudio preliminar para seleccionar un adyuvante eficaz para su uso en formulaciones vacunales frente a las infecciones por S. suis en el modelo murino, utilizando un protocolo basado en el estudio clínico y lesional, estudio microbiológico y respuesta inmune humoral de los animales infectados. Los tres adyuvantes utilizados (Hidróxido de Aluminio, aceite en agua e incompleto de Freund) mostraron un efecto protector frente a la muerte en las primeras 72 tras la infección, aunque el hidróxido de aluminio presento mejores resultados. Por último, se evaluó la capacidad protectora una nueva vacuna Wellvac-suis, elaborada con la proteína rSsnA, con una combinación de hidróxido de aluminio y QuilA como adyuvantes, en un ensayo experimental en cerdos. 3. Conclusión Nuestros resultados demuestran que la aplicación de dos dosis de la vacuna Wellvac-suis (elaborada con la proteína rSsnA, con una combinación de hidróxido de aluminio y QuilA como adyuvantes) a los animales, separada 14 días, estimula una fuerte respuesta inmune específica, aunque esta respuesta, tal como es evaluada en éste ensayo, no es capaz de proteger a los animales frente a una infección por S. suis serotipo 2, probablemente debido a que los anticuerpos inducidos no tuvieron capacidad opsonizante.