Terapia combinada con genes suicidas y agentes quimioterapéuticos como nueva estrategia antitumoral en cáncer de colon

Resumo

El cáncer colorrectal es una causa importante de mortalidad, con una supervivencia a los 5 años de aproximadamente el 50%. Células de carcinoma de colon a menudo resultan resistentes a las terapias convencionales, y hay una necesidad urgente de nuevos tratamientos alternativos. La terapia combinada con genes suicidas y fármacos citotóxicos es una estrategia prometedora para el tratamiento del cáncer avanzado. Objetivo: El objetivo de este estudio es investigar la utilidad de una terapia combinada con los dos genes suicidas gef y apoptina y fármacos antitumorales usados en primera línea de tratamiento del cáncer de colon en la línea DLD-1 de carcinoma colorrectal. Metodología: Los genes gef y apoptina fueron clonados en un sistema de expresión génica mediada por retrovirus regulado por doxiciclina. La expresión de ambos genes fue confirmada por RT-PCR. La viabilidad celular se determinó con sulforodamina B. El kit de anexina V-FITC se utilizó para evaluar la apoptosis y los resultados se confirmaron por microscopía electrónica. El potencial de membrana mitocondrial se midió con el JC-1. Por otra parte, se estudió el efecto combinado de los genes gef y apoptina junto con los fármacos antitumorales oxaliplatino, irinotecan y 5-flourouracilo determinando su concentración inhibitoria 50 (IC50). Resultados: Nuestros resultados mostraron que la expresión combinada de los genes gef y apoptina era sorprendentemente más eficaz en comparación con la expresión de los genes solos. La co-expresión de gef y apoptina potencia sinérgicamente la disminución de la viabilidad celular, el aumento de la necrosis y la inducción de la apoptosis a través de la vía mitocondrial, lo que puede ser deficiente en el cáncer de colon avanzado o metastásico. Además, el uso de muchos agentes quimioterapéuticos presenta las grandes limitaciones derivadas de su toxicidad y de su pobre afinidad por el tumor. El tratamiento combinado que implica terapia génica y dosis más bajas de drogas puede dar posibilidades de nuevos y más eficaces tratamientos contra el cáncer. Nuestros resultados demuestran que la inhibición de la proliferación tumoral se ha producido con unas dosis IC50 hasta un 65,84%, 66,33% y 60.42% mas bajas en el caso de oxaliplatino, irinotecan y 5-flourouracilo respectivamente, en comparación con la línea control tratada. La combinación gef-apoptina/5FU-OXA-IRI muestra mejores resultados que una terapia únicamente con fármacos llegando a destruir aproximadamente el 100% de las células tumorales con reducidas dosis de fármaco. Conclusiones: Los resultados experimentales con los genes suicidas gef y apoptina indican su eficacia como herramienta para el desarrollo de protocolos de terapia génica que solos o en combinación con agentes citotóxicos pueden mejorar la respuesta de los pacientes con cáncer de colon.