Regulación farmacológica de la conducta impulsivaimplicación del receptor cannabinoide cb2 y utilidad terapéutica de fármacos anticonvulsivantes

Resumen

El primer objetivo que se planteó para dotar de una base los estudios que se han realizado en la presente tesis, fue la modelización animal de la conducta impulsiva atendiendo a su carácter multifactorial. Para ello se emplearon varios paradigmas conductuales, entre los que destaca la tarea de refuerzo demorado por ser la que evalúa de una forma más específica el nivel de impulsividad. Asimismo, también fue relevante la selección de dos cepas de ratón que se distinguieran claramente por sus patrones de impulsividad. De esta forma se podrían estudiar las posibles diferencias de expresión génica que pudieran estar relacionadas con su distinto nivel impulsivo, y obtener una cepa de ratón muy impulsiva en la que evaluar el efecto de determinados fármacos (artículo 1, figura 1). Entre las diferencias que se encontraron, destacaron aquellas relativas al rCB2, que nunca se había estudiado en relación a impulsividad (artículo 1, figura 2). Para poder relacionar estas diferencias con el distinto grado de impulsividad, se realizaron estudios farmacológicos con fármacos agonistas (JWH133) y antagonistas (AM630) selectivos del rCB2. Los resultados mostraron una modulación de diversas conductas de tipo impulsivo que dependió de la prueba y la dimensión que se valoraba (artículo 1, figuras 4, 5 y 6). Dado que sólo el JWH133 fue capaz de disminuir el rechazo a la imposición de demoras, reduciendo el nivel de elección impulsiva y el número de respuestas no efectivas durante el tiempo de demora, se valoró si el tratamiento además normaliza los niveles aumentados de receptor CB2 en los ratones DBA/2 (en comparación con la cepa A/J). Finalmente, el receptor CB2 disminuyó con el tratamiento prolongado que se realizó con el JWH133, alcanzando el mayor efecto con la dosis más elevada (3 mg¿Kg-1) (artículo 1, figura 7). Este resultado confirma en gran medida la hipótesis sobre la posible implicación del rCB2 en la regulación de la impulsividad, ya que su activación no sólo disminuye las dimensiones cognitiva y motora de la conducta impulsiva, sino que además normaliza los niveles de expresión génica del rCB2 en las regiones donde se encontraba aumentado. En multitud de trastornos psiquiátricos la impulsividad desempeña un papel etiopatogénico relevante, por lo que resulta muy interesante poder disponer de herramientas farmacológicas cuyo mecanismo de acción esté dirigido a su alivio. Algunos fármacos anticonvulsivantes han demostrado gran eficacia en el tratamiento de determinados trastornos como el abuso de sustancias, sin conocer con exactitud a qué se debe su utilidad terapéutica. Una de las hipótesis que se barajan es la posible modulación de la conducta impulsiva. Por este motivo, en la presente tesis se evaluó el efecto de dos anticonvulsivantes, la pregabalina y el topiramato, sobre el nivel de elección y acción impulsiva empleando los ratones DBA/2 que se seleccionaron en el artículo 1. Los resultados mostraron que la pregabalina no sólo no fue capaz de disminuir alguno de estos parámetros, sino que además exacerbó la impulsividad motora cuando se administró crónicamente. Por otro lado, el topiramato disminuyó la acción impulsiva administrado sólo durante la fase de aplicación de demoras, y redujo el nivel de elección impulsiva de forma crónica (artículo 2, figuras 3, 4, 5 y 6). Además, se valoraron los efectos sobre otros dos parámetros que guardan cierta relación con el nivel de impulsividad: la búsqueda de la novedad y el nivel elevado de ansiedad. La pregabalina no tuvo efectos sobre la búsqueda de la novedad, mientras que redujo claramente la ansiedad de los ratones DBA/2, por lo que sus efectos parecen estar muy relacionados con el alivio de este parámetro. El topiramato también redujo la ansiedad aunque sólo con la dosis más elevada, y sí que produjo un descenso en la curiosidad de los animales lo cual se ha relacionado anteriormente con el tratamiento de las drogodependencias (artículo 2, figuras 1 y 2). Por último, se evaluó la expresión génica de algunas dianas relevantes, entre ellas el rD2 que ya se había visto claramente disminuido en los ratones con mayor grado de impulsividad. El tratamiento con topiramato fue capaz de aumentar significativamente la expresión de este receptor, efecto que se podría asociar a la disminución de la impulsividad que produce el fármaco. Asimismo, el receptor adrenérgico alfa-2a (alfa-2ar) también se analizó por su relación con la acción impulsiva, observándose una disminución que podría ser atribuible al efecto que la pregabalina tiene a nivel crónico (artículo 2, figura 7). Debido a que el topiramato fue el agente anticonvulsivante que demostró tener un claro efecto de tipo anti-impulsivo, el siguiente objetivo fue valorar el efecto sobre el consumo y motivación hacia el alcohol de la combinación de topiramato con naltrexona. Lo primero fue generar un modelo animal de conducta operante para que finalmente el ratón lograse auto-administrarse de forma voluntaria alcohol. Se utilizaron ratones de la cepa C57BL/6, ya que su base genética les predispone hacia un mayor consumo de alcohol. Después de seleccionar aquellos ratones que cumplían los criterios de selección, se compararon los 4 grupos: vehículo, naltrexona (0,7 mg¿Kg-1), topiramato (25 mg¿Kg-1) y naltrexona + topiramato. Los resultados fueron muy significativos ya que la combinación de ambos fármacos tuvo un efecto muy superior al de cada fármaco de forma aislada (resultados adicionales, figura 9). Además, cuando los ratones se auto-administraron agua y luego fueron tratados, no se observó ningún efecto. Esto indica que la disminución en la activación de palancas, el consumo y la motivación es específica hacia el alcohol (resultados adicionales, figura 10). Finalmente, también se valoró el efecto derivado del tratamiento con topiramato y/o naltrexona sobre la expresión de determinados genes: rMO, rCB1 y TH. La expresión del primero y el último se redujo significativamente con la naltrexona, aunque el efecto más notable fue la reducción en mayor proporción producida por la combinación de ambos fármacos (resultados adicionales, figura 11). Por tanto, se encontró una correlación entre el mayor efecto a nivel conductual con la mayor disminución de los niveles de expresión génica en el grupo tratado con naltrexona + topiramato. Sin embargo, se desconoce por el momento el mecanismo específico por el cual la asociación de estos fármacos produce una acción sinérgica. - Los resultados que se incluyen en la presente tesis doctoral están extraídos de los siguientes artículos originales: Artículo 1: Título: Cannabinoid CB2 receptor-mediated regulation of impulsive-like behaviour in DBA/2 mice. Autores: Navarrete F, Pérez-Ortiz JM, Manzanares J. Revista: British Journal of Pharmacology (Factor de impacto 2010: 4,925). Fecha de publicación: Enero 2012. Volumen, número y páginas: 165(1):260-73. Artículo 2: Título: Pregabalin and topiramate-mediated regulation of cognitive and motor impulsivity in DBA/2 mice. Autores: Navarrete F, Pérez-Ortiz JM, Manzanares J. Revista: British Journal of Pharmacology (Factor de impacto 2010: 4,925). Fecha de publicación: Abril 2012. Volumen, número y páginas: en prensa. Artículo 3 (resultados adicionales): Título: Naltrexone and topiramate combination usefulness on ethanol consumption and associated neurochemical changes in C57BL/6 mice. Autores: Navarrete F, Manzanares J. Revista: Neuropsychopharmacology (Factor de impacto 2011: 7,992). (próximo envío)