Nuevas metodologías analíticas para la determinación de ocratoxina aextracción con polmeros de impronta molecular e inmunosensores nanoestructurados piezoeléctricos y electroquímicos

Resumen

La tesis que se presenta propone el desarrollo de inmunosensores nanoestructurados piezoeléctricos y electroquímicos para la determinación de Ocratoxina A y la extracción automatizada en fase sólida con polímeros de impronta molecular. Los objetivos concretos de la tesis inciden en la investigación de los procedimientos de inmovilización sobre la superficie del cristal de cuarzo en el caso de la transducción piezoeléctrica y sobre la superficie de electrodos serigrafiados (SPCEs) en el caso de la transducción electroquímica, en las interacciones entre los receptores y ligandos correspondientes y en los procesos de caracterización óptica y electroanalítica de los bioreactivos empleados. Se propone la mejora de la sensibilidad y de las propiedades analíticas de los inmunosensores actuando sobre la propia transducción a través del uso de nanopartículas metálicas, como nanopartículas de oro, y de micropartículas magnéticas. El uso de partículas magnéticas permitirá llevar a cabo las etapas de incubación, lavado y separación de forma separada en ambos tipos de biosensores, para finalmente concentrar sobre la superficie del electrodo de trabajo mediante un campo magnético y así evitar problemas de adsorción inespecífica y del efecto de la matriz compleja de las muestras de alimentos. Otro aspecto importante está relacionado con el tratamiento de las muestras de alimentos para su posterior análisis. En este trabajo se pretende además la síntesis de polímeros modelados molecularmente (MIPs) para su uso selectivo en el proceso de limpieza y separación de la OTA en las muestras de alimentos. La afinidad de los MIPs diseñados se empleará en la separación de la OTA de los componentes de la matriz y de otras micotoxinas de la muestra, empleando columnas de extracción en fase sólida en un sistema automatizado y a la vez detectando la OTA eluída en el mismo sistema por fluorescencia molecular.