Implicación de la adición de N-acetilcisteína en los medios de cultivo de gametos y embriones criopreservados

Resumen

La capacidad de criopreservar gametos o embriones de mamíferos se ha convertido en una técnica fundamental en las clínicas reproductivas. Se ha demostrado que la criopreservación y los crioprotectores alteran las propiedades físicas y químicas de las células. Además, la tolerancia al proceso varía dependiendo del material genético que se pretenda criopreservar. La congelación de semen epididimario es más dificultosa que la del semen eyaculado debido a que éste no ha tenido contacto con el plasma seminal (fuente principal de antioxidantes y colesterol). Por otro lado, la vitrificación de los ovocitos y los primeros estadios de desarrollo embrionario toleran peor el proceso debido a la baja permeabilidad de la zona pelúcida a los medios; además, los embriones producidos in vitro tienen una calidad inferior que los producidos in vivo, siendo más susceptibles de sufrir daños irreversibles durante la vitrificación. Por lo tanto, en los experimentos realizados en la presente Tesis Doctoral nos centramos en la mejora de los procesos de criopreservación de gametos y embriones en los estadios que presentan peor tolerancia al proceso. Analizamos el efecto de la adición de N-Acetilcisteína a ovocitos, embriones de ratón (2 células) y espermatozoides epididimarios criopreservados de toro de Lidia con el fin de determinar si el uso de este antioxidante mejora la calidad de los embriones y gametos tras la criopreservación. Además, se intentó determinar si tras la refrigeración prolongada a 4ºC (24-96 horas) el uso combinado de glicerol y dimetilformamida (DMF) mejoraba la calidad del semen de toro de Lidia post-descongelación