Papel diferencial de las diacilglicerol quinasas Alfa y Zeta en el control de la respuesta T citotóxicaImplicaciones para la inmunoterapia antitumoral

Resumen

La activación del receptor de células T (TCR) tras el reconocimiento antigénico da lugar a la producción de diacilglicerol (DAG) por la fosfolipasa C γ (PLCγ). La generación y acumulación del DAG en la sinapsis inmune (IS) es un mecanismo esencial que coordina la fuerza del antígeno con la intensidad de la respuesta del linfocito T. Las diacilglicerol quinasas (DGK) catalizan la conversión de DAG en ácido fosfatídico (PA). DGKα y DGKζ, las dos isoformas que se expresan en células T, presentan funciones redundantes y específicas, siendo DGKζ la que ejerce un mayor control sobre las rutas de señalización reguladas por DAG. Inicialmente, caracterizamos la contribución de DGKζ en la regulación del DAG y la producción de PA en la sinapsis citotóxica. Para ello, caracterizamos un biosensor que nos permitió seguir las dinámicas del DAG durante la formación de la IS. Experimentos en células T citotóxicas (CTLs) OT-I mostraron que la afinidad del antígeno no se reflejaba en la generación inicial de DAG sino en la polarización de organelas ricas en DAG a la IS. En este sentido, la deficiencia en DGKζ no alteraba la generación inicial de DAG en la IS, pero sí daba lugar un mayor reclutamiento de estas organelas, lo cual sugiere que dicha polarización contribuye a aumentar la intensidad de la señal. Sin embargo, las CTLs DGKζ-/- mostraban un defecto en la reorientación del centro organizador de microtúbulos (MTOC) hacia la IS que correlacionaba con una menor activación de la proteína regulada por PA, PKCζ. Adicionalmente, estudiamos el papel de DGKζ en la respuesta a interleuquina (IL) 2 o 15 en ausencia de estimulación antigénica. Demostramos que los ratones DGKζ-/- pero no los DGKα-/- exhibían un aumento de las poblaciones T CD8+ con fenotipo de memoria independientes de antígeno. La expansión in vitro inducida por citoquinas de las células CD8+ deficientes en DGKζ-/- promovía un aumento de células T citotóxicas de tipo innato y correlacionaba con una mayor respuesta anti-tumoral ante tumores subcutáneos de células de linfoma A20 y de células de melanoma B16F10. Defectos en la expresión de DGKζ correlacionan con el desarrollo de anemia aplásica (AA) en humanos. Hemos demostrado que las células T de la médula ósea (BM) de ratones DGKζ-/- muestran un fenotipo hiperactivado que correlaciona con defecto en las poblaciones eritroides. Sin embargo, estos animales, no presentan signos clínicos de anemia lo cual sugiere que la carencia de DGKζ solo es un factor de predisposición de la enfermedad. Nuestros estudios sugieren que la carencia en DGKζ promueven tanto la activación del TCR como la respuesta a citoquinas, potenciando tanto la respuesta anti-tumoral como el desarrollo de enfermedades autoinmunes como la AA.