Estudio de la función del receptor notch-1 en la activación del macrófago.

Abstract

1- Los macrófagos murinos diferenciados expresan los receptores Notch-1, -2 y -4, y los ligandos Jagged-1 y -2, así como diferentes enzimas implicadas en el procesamiento y glicosilación de estos receptores, como la convertasa Kuzbanian, la g-secretasa presenilina 1, y las glicosidasas Fringe. 2- La expresión del receptor Notch-1 y del ligando Jagged-1 se incrementa tras la activación en los macrófagos murinos de diferentes receptores Toll. Esta inducción es dependiente de p38 MAP quinasa. El tratamiento con INFg potencia la expresión de Notch-1 inducida por los receptores Toll-4. 3- El tratamiento de los macrófagos con LPS y TNFa o LPS y INFg induce la activación del receptor Notch-1 en los macrófagos murinos, causando la liberación de su dominio intracelular transcripcionalmente activo. 4- La expresión del domino intracelular de Notch-1 produce un incremento en la activación del macrófago inducida por los lipopolisacáridos bacterianos, tanto en presencia como en ausencia de INFg, lo que origina un aumento en la producción de citoquinas, como TNFa e IL-6; de enzimas citotóxicos, como la Óxido Nítrico Sintasa inducible; de proteínas de membrana, como ICAM-1; de proteínas del MHC de tipo II; y de factores de transcripción, como IRF-1. 5- La potenciación de la activación de los macrófagos inducida por Notch-1 es debida, al menos en parte, a un aumento de la actividad de los factores de transcripción Stat1 y NF-kB. 6- Notch-1 incrementa la actividad transcripcional de Stat1 tras la activación de los macrófagos con INFg, sin modificar el estado de fosforilación de esta proteína, ni su capacidad de translocación al núcleo o de unión al DNA in vitro. Este proceso sucede, probablemente, al favorecerse el reclutamiento de coactivadores, o impedir la unión de corepresores de este factor de transcripción. 7- El incremento de la actividad de NF-kB inducida por Notch-1 es debida a un aumento de su translocación al núcleo y de su unión al DNA, originado, en parte, por una mayor degradación de la proteína IKBa, consecuencia del aumento de la fosforilación y activación de la IKB quinasa b, y también del incremento en la expresión de algunas proteínas del complejo NF-kB. 8- La señalización a través del receptor Notch-1 potencia la expresión de múltiples genes implicados en la actividad efectora de los macrófagos, por lo que esta vía de señalización puede constituir un nuevo elemento de control de la respuesta inflamatoria con implicaciones terapéuticas.