Determinación de mutaciones en el gen vhl en el cáncer de riñón de células renales de aparición esporádica implicaciones pronósticas y consecuencias en la función y estructura de su proteína

Resumen

INTRODUCCIÓN En la etiología del cáncer renal de células renales (CCR) se han implicado diversos factores, entre ellos los genéticos. Dentro de éstos, la alteración del brazo corto del cromosoma 3 es un hecho muy frecuente. En dicha localización se encuentra el gen vhl, gen supresor tumoral, relacionado con la enfermedad de von Hippel-Lindau, de transmisión familiar. Dicho gen puede presentar alteraciones en el CCR de aparición esporádica, de manera que se producen alteraciones que impiden una correcta ejecución de la función supresora de la proteína resultante. OBJETIVOS Determinar la existencia de mutaciones en el gen vhl en tejido renal tumoral de pacientes con carcinoma renal esporádico. Analizar el tipo y localización de mutaciones encontradas, así como el cambio que produce en la proteína y si éste asienta en lugares importantes desde el punto de vista funcional. Además, relacionar la presencia de mutaciones con factores pronósticos como el estadio tumoral, tipo histopatológico, grado nuclear, etc., analizando también la estructura secundaria de la proteína mutada. SUJETOS, MATERIAL Y MÉTODO Estudio descriptivo observacional y analítico sobre 86 pacientes diagnosticados de CCR y tratados quirúrgica mente en el Servicio de Urología del Complejo Hospitalario Universitario de Albacete, entre Agosto de 2000 y Mayo de 2004. Se obtuvieron muestras de tejido tumoral de los especimenes quirúrgicos así como de tejido renal sano que se utílizaron como control. De dichas muestras se extrajo ADN para la amplificación de cada uno de los 3 exones que conforman el gen vhl, mediante la técnica de PCR. El producto amplificado se sometió a secuenciación automática, con el objeto de detectar mutaciones en las regiones codíficantes del gen. Asimismo se realizó la caracterización de las mutaciones encontradas, analizando los cambios de aminoácido producidos en la proteina y una predicción de la estruct