Descubrimiento y caracterización de la actividad antiviral inducida por las moléculas tipo crp de pez cebra (danio rerio)

Resumen

La proteína C-reactiva (CRP) es una pentraxina corta cuyos niveles séricos en mamíferos aumentan en presencia de estímulos desencadenantes de la respuesta de fase aguda y, por tanto, es ampliamente utilizada en clínica como biomarcador de inflamación. Clásicamente, la CRP ha sido descrita como una molécula de reconocimiento de patrones bacterianos y de células dañadas que actúa como primera línea de defensa del huésped. El presente trabajo aporta evidencias sobre una nueva función de esta molécula que se añade a su ya extensa lista de actividades descritas. En esta tesis se ha demostrado, in vitro e in vivo, la actividad protectora de las CRPs de pez cebra (zfCRP1-7) frente al virus de la viremia primaveral de la carpa (SVCV). Asimismo, se ha descubierto que existe una alta afinidad de las zfCRPs por los colesteroles, mostrando una unión preferencial por el 25-hidroxicolesterol (25-HOC), un lípido cuya actividad anti-SVCV ha sido descrita previamente y que muestra efectos sumatorios con la protección ofrecida por las zfCRPs. La exploración de los posibles mecanismos responsables de la protección antiviral conferida por las zfCRPs descartó la interferencia de estas moléculas con el proceso de entrada (unión al receptor y fusión) del virus, sugiriendo la regulación de algún mecanismo antiviral en la célula. También se ha descartado que esta actividad antiviral sea mediada por el sistema de interferón, el cual incluso se reprime tras el tratamiento de las células con zfCRPs. De acuerdo con nuestros resultados, las zfCRPs bloquean la autofagia o la vía endocítica del virus, dos procesos que convergen en el ciclo de replicación de otros virus. Por tanto, en este estudio se propone que la inhibición de la infectividad de SVCV se produce como consecuencia del bloqueo de la fusión de los endosomas/autofagosomas que contienen SVCV con el lisosoma. Este bloqueo evita la acidificación requerida para la actividad fusogénica de la proteína G vírica y, por tanto, impide la liberación del virus al citoplasma y su replicación. Este efecto también se observó tras el tratamiento de las células con 25-HOC o metil-β-ciclodextrina (secuestrador de colesterol) previo a la infección con SVCV, sugiriendo la alteración de los niveles de colesterol celulares como causa de la actividad antiviral. La desregulación de estos niveles parece estimular la producción de especies reactivas de oxígeno, lo que llevaría a la inhibición de la fusión autofagosoma-lisosoma.