Estudio de la heterocromatina en cromosomas fijados de bóvidos domésticos (Bos Taurus, Ovis Aries y Capra Hircus)

Resumen

En el presente trabajo, hemos utilizado las técnicas clásicas (bandeo-CBG y - GTG), los bandeos fluorescentes secuenciales CDD y bandeos con endonucleasas de restricción para estudiar, detectar y caracterizar la heterocromatina sobre cromosomas fijados de tres especies de bóvidos domésticos, vacuno (Bos taurus, L.), ovino (Ovis aries, L.) y caprino (Capra hircus, L.). Hemos obtenido los cariotipos de bandeo-C, -G, -R, -QFH y NOR poniéndose de manifiesto la conservación estructural de los diferentes patrones de bandeo en los bóvidos domésticos en estudio. Se han analizado las equivalencias cromosómicas entre ellas, permitiéndonos hacer una mejor descripción de sus cariotipos y paliar las deficiencias puestas de manifiesto por otros autores en ovino y caprino. Con estas técnicas se ha demostrado una localización, distribución y composición aparentemente homogénea de la cromatina de la región centromérica. Sin embargo, algunos trabajos mostraban que la heterocromatina puede presentar variaciones heteromórficas, siendo difícil identificar a los cromosomas implicados en estas variaciones. Esto fue una consecuencia de la ambigüedad identificadora de la técnica de bandeo-CBG en estas especies, sobre todo si tenemos en cuenta su gran número de cromosomas acrocéntricos. Nuestros resultados con las técnicas clásicas no difieren de los publicadas por otros investigadores. La composición de la heterocromatina de las tres especies fue similar, como lo demuestran nuestras observaciones de cromosomas teñidos con la técnica fluorescente secuencial (CDD). Así, la presencia de fluorescencia intensa con CMA3 sobre la heterocromatina centromérica mostró que contiene heterocromatina enriquecida en pares de bases GC. Además, detectamos polimorfismos inter- e intraespecíficos. Asimismo, el bandeo-R obtenido confirmó que durante el proceso evolutivo tuvieron lugar pequeñas modificaciones del patrón de bandas, que han sido utilizadas para separar la Subfamilia caprinae de la bovinae. Por otro lado, una mejor caracterización de la heterocromatina de los cromosomas fijados de los bóvidos analizados en este trabajo ha sido obtenida por el tratamiento con Endonucleasas de Restricción, produciendose bandeos informativos de las diferencias del ADN satélite contenido en la áreas heterocromáticas. Los efectos observados permitieron caracterizar diferentes fracciones de ADN satélite localizado sobre la heterocromatina constitutiva de los cromosomas del complemento de las tres especies. Endonucleasas como AluI y DdeI produjeron modelos de bandeo-C diferentes en bovino frente al de caprinos y ovinos, indicando diferencias de ADN satélite entre ambas subfamilias. Por otro lado, otras endonucleasas de restricción produjeron patrones de bandeo -G o -C que diferían menos entre especies, salvo excepciones encontradas para los cromosomas sexuales. Por todo ello, bajo la heterocromatina subyace una organización estructural de las diferentes fracciones del ADN satélite que, en unos casos, han mostrado una intensa conservación de las dianas de restricción durante la evolución y, en otros casos, se han mostrado fuertes divergencias. Estas divergencias han sido utilizadas por la evolución como un camino cuyas últimas consecuencias se desconocen en la actualidad. La aplicación de bandeos clásicos de buena resolución, bandeos de restricción y la utilización de cromosomas marcadores para una o varias endonucleasas de restricción junto con el apoyo de otras técnicas útiles en producción animal, servirían para determinar con mayor precisión si estas divergencias evolutivas tienen aplicaciones zootécnicas.