Estudio de la prevalencia de los polimorfismos comunes del gen del VDR y su relación con la densidad mineral ósea en mujeres españolas postmenopáusicas

Resumen

La osteoporosis es el trastorno metabólico óseo más frecuente en todo el mundo. Así mismo, la postmenopausia es la época de la vida de la mujer en la que se ha identificado una mayor disminución en la masa ósea y aumento de fracturas, constituyendo un problema sanitario de primera magnitud debido a su alta prevalencia, coste sanitario y social. Durante los últimos 15 años, han sido muchos los estudios que han centrado sus objetivos en la identificación de marcadores genéticos, así como en polimorfismos de estos, implicados en la susceptibilidad a la osteoporosis, presentando resultados contradictorios. Muy pocos estudios han sido realizados en la población española, constituyendo estos resultados no forzosamente extrapolables a dicha población, ya que provienen de muestras étnicas muy diferentes con situaciones ambientales diversas. Se han identificado multitud de genes que pueden estar implicados en este trastorno, entre ellos el gen del receptor de la vitamina D (VDR); aunque sus mecanismos de influencia sobre la masa ósea no han sido completamente aclarados, resultan fundamentales para poder identificar correctamente a las mujeres en riesgo de presentar un peor pronóstico óseo, así como para instaurar un tratamiento preventivo precoz. Se pretende analizar la prevalencia de los polimorfismos del gen del receptor de la vitamina D, con las enzimas de restricción BsmI y ApaI en mujeres españolas postmenopáusicas, determinando los efectos de los polimorfismos anteriores sobre la densidad mineral ósea en diferentes regiones anatómicas en mujeres españolas postmenopáusicas, junto con el aislamiento del efecto de los factores de confusión biológicos-ambientales (dieta, historial de fracturas, parámetros antropométricos, etc.) sobre la densidad mineral ósea (DMO). Además, se pretende determinar el riesgo de osteoporosis en función de los polimorfismos del gen del receptor de la vitamina D BsmI y ApaI observados en mujeres españolas postmenopáusicas. Se partió de un estudio transversal-observacional conformado por un total de 210 mujeres postmenopáusicas de la Comunidad Autónoma de Extremadura estudiadas en los laboratorios del Grupo de Investigación de Enfermedades Metabólicas Óseas (GIEMO) del Departamento de Enfermería de la Universidad de Extremadura con una edad media de 60±8 años, con una edad media de menarquia de 12.89±1,45 años y con 13.1±8.8 años de media desde la menopausia. La estrategia metodológica llevada a cabo consistió en la obtención de datos demográficos, antropométricos, dietéticos, densitométricos, junto con los antecedentes personales de fracturas, historia hormonal y reproductiva, estilo de vida y encuesta dietética; obtención de ADN genómico a partir de saliva de mujeres españolas postmenopáusicas; aislamiento del ADN genómico; cuantificación de muestras genómicas mediante medición espectrofotométrica de la cantidad de radiación UV absorbida por las bases a 260 nm y evaluación de los polimorfismos del gen del receptor de la vitamina D por medio de ensayo TaqMan. La PCR en tiempo real se realizó según protocolo oficial TaqMan Universal PCR (Applied Biosystems©). El estudio densitométrico fue realizado a partir de un absorciómetro de rayos X de energía dual (DXA) marca NORLAND EXCELL©, calibrado de acuerdo a las instrucciones del fabricante; la determinación del coeficiente de variación intrínseca fue realizado a partir de fantoma diseñado específicamente para el absorciómetro. Para la realización de todas las pruebas estadísticas se utilizó el software IBM® SPSS® Statistics 20 (Statistical Package for the Social Sciences®). Se ha utilizado la prueba t-test y el análisis de varianza (two-way ANOVA) con la prueba post-hoc de diferencia de medias entre grupos de Bonferroni/Dunn, así como la regresión simple y múltiple (multiple-stepwise regression), junto con el análisis de correlaciones parciales ajustadas. Además, se ha confirmado el cumplimiento del Equilibrio Hardy-Weinberg (EHW) en nuestro genotipado. La ventaja principal del presente estudio es la homogeneidad étnica de las participantes, la realización exhaustiva de determinaciones de DMO en diferentes regiones anatómicas, así como el tamaño muestral utilizado, ya que constituye el segundo mayor hasta la fecha en población española. En nuestro estudio no se ha observado ninguna relación significativa entre la densidad mineral ósea (DMO), medida en columna lumbar (L2, L3, L4, L2-L4), cuello femoral, trocánter o triángulo de Ward, y la presencia de los polimorfismos BsmI y ApaI del gen del receptor de la vitamina D en mujeres españolas postmenopáusicas. Tampoco se han encontrado evidencias de presencia de fracturas o incremento del riesgo asociado, relacionadas con los polimorfismos estudiados. Los diferentes estudios realizados parecen indicar que la expresión del gen del VDR está modulada por factores medioambientales, relacionados con la homeostasis del calcio. En esta línea, nuestros resultados parecen confirmar que la ingesta de calcio pueda ser un factor ambiental que de alguna manera modifique el efecto que los polimorfismos genéticos estudiados ejerzan sobre la DMO en mujeres postmenopáusicas. En nuestro caso, los genotipos bb y Aa (polimorfismos BsmI y ApaI, respectivamente) presentan ventajas frente a los otros genotipos, bajo la ingesta adecuada de calcio y una vez ajustado por edad e índice de masa corporal (IMC), ya que presentan correlaciones positivas y significativas con la DMO. A partir de modelos matemáticos, el estudio de regresión multivariante permitió establecer ecuaciones predictoras de la DMO en columna lumbar (L2-L4) y cadera (cuello femoral) en base a los polimorfismos BsmI y ApaI estudiados. El mejor ajuste al modelo teórico se obtuvo en el cuello femoral con el genotipo BB. La utilización de estos modelos presentan una eleva utilidad desde el punto de vista preventivo de la osteoporosis, así como de las fracturas de etiología osteoporótica.