Caracterización de la respuesta inmune frente a "Leishmania" en individuos inmunodepresivos

Resumen

La leishmaniasis comprende un conjunto de enfermedades infecciosas causada por protozoos parásitos, intracelulares obligados, del género Leishmania. Las principales manifestaciones clínicas de la enfermedad se clasifican en: leishmaniasis cutánea, leishmaniasis mucocutánea, leishmaniasis visceral y leishmaniasis dérmica post-Kala-azar. Hay una parte de las infecciones que permanecen asintomáticas, sin embargo no existe un test de referencia para detectar a estos sujetos lo que dificulta conocer la extensión real de la infección por Leishmania. La leishmaniasis es endémica en más de 98 países, incluidos España donde está causada por Leishmania infantum. Desde el año 2009, en el que se declaró un brote en la zona sudoeste de la Comunidad de Madrid, se han reportado más de 700 casos en esa área, principalmente en el municipio de Fuenlabrada. La respuesta inmune celular adaptativa es la respuesta inmune principal asociada a la protección de la infección por Leishmania. La inmunosupresión es el mayor factor de riesgo individual para el desarrollo de leishmaniasis visceral, existiendo en estos pacientes mayor riesgo de recaídas, peor respuesta al tratamiento y mayores tasas de mortalidad. En la actualidad, existe la necesidad de un test de referencia que permita medir la respuesta inmune tras el tratamiento, monitorizar la cura y predecir las recaídas de los pacientes. Por todo ello los dos objetivos principales de esta tesis han sido buscar marcadores característicos de la infección asintomática validos en sujetos inmunocompetentes e inmunosuprimidos; y buscar marcadores relacionados con la cura y predictores de recaída en pacientes inmunocompetentes e inmunosuprimidos con leishmaniasis visceral mediante la caracterización de la respuesta inmune frente al antígeno soluble de Leishmania (SLA), residentes todos ellos en una zona endémica (Fuenlabrada, Madrid). Los resultados mostraron que mientras que las técnicas moleculares y serológicas no permiten la detección de los sujetos asintomáticos, el empleo de la proliferación celular frente al antígeno SLA y la producción de IFN-g permitieron la detección de sujetos con infección asintomática, tanto en el caso de los inmunocompetentes como de los inmunodeprimidos. El estudio de las subpoblaciones linfocitarias puso de manifiesto que no existían diferencias en las mismas entre los sujetos control y los asintomáticos. Los pacientes con leishmaniasis visceral activa presentan una inmunosupresión generalizada que no les permite desarrollar una respuesta inmune frente al parásito presentando las pruebas celulares negativas. Sin embargo tras el tratamiento efectivo, se desarrolla una respuesta inmune frente a Leishmania que se caracteriza por una respuesta proliferativa positiva y una producción especifica de IFN-g. Al comparar los niveles de las subpoblaciones celulares de los pacientes activos vs curados, encontramos que la depresión generalizada se recupera tras el tratamiento. Las principales conclusiones que hemos obtenido son las siguientes: El ensayo de proliferación celular tras la estimulación con el antígeno SLA y la posterior determinación de IFN-g, han demostrado ser una técnica de utilidad para la detección de la infección asintomática. Además, esta técnica ha servido para establecer la cura tras el tratamiento en pacientes con leishmaniasis visceral inmunocompetentes e inmunosuprimidos, tanto por causas farmacológicas como por infección por el VIH. Esta técnica ha demostrado ser un buen predictor de recaída, asociándose la falta de respuesta con el nuevo desarrollo de la enfermedad clínica. En los pacientes VIH+ curados de leishmaniasis visceral que tras tratamiento, presentan una producción específica de IFN-g tras la estimulación con SLA ha sido posible retirar la profilaxis secundaria, incluso con valores de T CD4+ por debajo de 200 células/mm3, sin recaídas hasta la fecha.