Development of an in-vitro animal model to evaluate novel pharmaceutical approaches to ded management

Resumen

Dentro del campo oftalmolo¿gico, patologi¿as multifactoriales como Enfermedad del Ojo Seco (EOS) y Cataratas son ampliamente estudiadas a trave¿s de modelos animales que no reproducen con exactitud estas condiciones en humanos debido a su complejidad. Los recientes avances en la tecnologi¿a biome¿dica han mejorado la fiabilidad de modelos animales in-vitro/ex-vivo, y hasta el momento, el tejido de la co¿rnea y cristalino se han mantenido fisiolo¿gicamente estables de forma independiente durante 10 di¿as. Esta tesis describe el desarrollo de un nuevo y completo modelo de ojo anterior ex vivo, que es capaz de mantener tanto la co¿rnea como el cristalino en un estado fisiolo¿gico estable durante 7 di¿as. La plataforma se basa en ojos porcinos, que representan una fuente alternativa al tejido humano de alta calidad y fiable, y al tratarse de residuos de matadero, tambie¿n alinea perfectamente el proyecto con el principio 3Rs de reemplazar, refinar y reducir la experimentacio¿n con animales vivos. El modelo es modular y escalable, permitiendo la maximizacio¿n de la fiabilidad experimental y la minimizacio¿n de los residuos y el uso de energi¿a. Adema¿s, todo el sistema esta¿ disen¿ado para instalarse en un gabinete de flujo laminar, evitando la contaminacio¿n biolo¿gica externa, y facilitando su transporte entre los laboratorios de ingenieri¿a de tejidos, aumentando asi¿ la accesibilidad del mismo. El modelo fue validado estimando la viabilidad celular en el transcurso del tiempo. Se encontro¿ que los fibroblastos estromales eran viables hasta el se¿ptimo di¿a de cultivo, y el tejido corneal y cristalino mantuvieron su transparencia durante el peri¿odo de cultivo. La enfermedad del ojo seco se indujo con e¿xito en el modelo mediante irrigacio¿n de la superficie ocular cada 40 s, y se valido¿ utilizando la te¿cnica de citologi¿a de impresio¿n. Adema¿s, debido a que la posicio¿n del cristalino no se ha alterado, el modelo tambie¿n se utilizo¿ como plataforma para perfeccionar la cirugi¿a de cataratas e implantar con e¿xito lentes intraoculares (LIOs). El novedoso y completo modelo de ojo anterior ex-vivo desarrollado en esta tesis proporciona informacio¿n adicional sobre investigaciones pre-cli¿nicas del segmento anterior en oftalmologi¿a, dando un paso adelante para reducir las diferencias existentes entre las tecnologi¿as biome¿dicas in-vitro e in-vivo.