Estudio de las propiedades y aplicaciones del virus de la pseudorrabia (PRV) cuya expresión inmediatamente temprana es controlada por promotores tumorales humanos

Résumé

El cáncer es una enfermedad neoplásica que provoca la transformación de las células, incrementando su índice mitótico de manera anormal e incontrolada. Según la Organización Mundial de la Salud, es una de las principales causas de muerte en todo el mundo y se prevé que los pacientes diagnosticados con cáncer se dupliquen en los próximos 20 años. No obstante, la supervivencia a esta enfermedad se ha multiplicado por tres desde los años 70 gracias a los avances realizados tanto en diagnóstico como en tratamiento, siendo esencial el desarrollo de nuevos fármacos y estrategias terapéuticas frente al cáncer. Una de las líneas de investigación más novedosas en el campo de la oncología se centra en el estudio de los virus oncolíticos para combatir y tratar el cáncer. Actualmente los estudios se centran principalmente en aumentar la selectividad y la eficacia oncolítica de los virus mediante manipulación genética. El virus herpes más empleado es el herpes simplex tipo 1 (HSV‐1), presenta ventajas sobre otras familias víricas en su capacidad de incorporar grandes insertos, existencia de terapias específicas anti‐HSV, sin embargo también presenta un gran inconveniente al ser un patógeno humano ya que nunca podrá descartarse su virulencia. Recientemente se ha propuesto al virus de la pseudorrabia (PRV), perteneciente a la misma subfamilia de HSV‐1 pero de origen animal, como vector para terapia oncolítica, ya que mantiene las ventajas descritas para HSV‐1 y suma otras nuevas. El presente trabajo se ha centrado en aumentar la selectividad tumoral y la eficacia citolítica de virus PRV recombinantes controlando la transcripción de su único gen inmediatamente temprano, IE180, mediante promotores humanos preferentemente activos en tejidos tumorales: subunidad catalítica telomerasa transcriptasa inversa (hTERT) y antígeno carcinoembrionario (CEA). Para ello, se ha demostrado que ambos promotores pueden sustituir funcionalmente el promotor de la IE180 en plásmidos y en virus PRV recombinantes y se ha observado una capacidad diferencial de la IE180 para regular cada promotor, llevando en el caso del promotor del CEA a la sobre‐expresión de la IE180, lo que deriva en inducción de apoptosis en las células infectadas. Se ha observado que los virus recombinantes replican preferentemente en líneas celulares tumorales en comparación con células no tumorales. También se han obtenido virus recombinantes en los que la expresión de la IE180 está regulada bajo control del promotor inducible por tetraciclina, comprobando que presentan alta replicación en células de cáncer de páncreas en relación a un crecimiento residual en células normales.