Estudio de las células inmunocompetentes, macrófagos, células cebadas, de la angiogénesis y de la linfangiogénesis en la piel de los bordes quirúrgicos de úlceras por quemaduras

Resumen

RESUMEN En los pacientes con quemaduras graves cutáneas, las alteraciones clínicas e inmunológicas son bien conocidas. También se han descritos las lesiones histológicas generales, centradas en la formación de las ampollas, de las úlceras necróticas y de la necrosis coagulativa, asociada a infiltrados inflamatorios inespecíficos. Sin embargo, no existen estudios previos acerca de la distribución cuantitativa, tanto de las células inmunocompetentes como de los vasos sanguíneos y linfáticos en la dermis periulcerosa. Tampoco se han evaluado las relaciones entre los linfocitos T y B, los macrófagos y las células cebadas, así como los mecanismos de angiogénesis y linfoangiogénesis en la biopsia cutánea de pacientes quemados. En el presente estudio se han revisado 47 biopsias, correspondientes a 37 de pacientes quemados y 10 muestras de piel sana. Se han evaluado inmunohistoquímicamente y se han cuantificado morfométricamente los linfocitos T CD3+, linfocitos B CD20+, los macrófagos CD68+ y las células cebadas triptasa+; así como la expresión de CD31+ en las células endoteliales de la microvasculatura sanguínea y la expresión de D2-40+ en las células endoteliales de los capilares linfáticos. En la dermis que rodea a las úlceras cutáneas postquemadura, se han evaluado 11 regiones correlativas de 500 μ cada una, siendo la región 1 la zona más próxima a la úlcera y la región 11 la zona más periférica de la biopsia. El contaje de células inmunomarcadas se realizó directamente en el microscopio, utilizando un objetivo de 40x, de otra parte, se calculó el área ocupada por los microvasos sanguíneos y linfáticos, en relación con el área de la dermis de cada región evaluada, usando el programa Image J. La respuesta inmunológica es diferente en la porción central de la quemadura, (donde se produce una ulceración y necrosis completa del tejido), que en los bordes de piel que rodean a la ulceración. Hemos evidenciado una variable cantidad de macrófagos CD68+ en la zona periulcerosa; así como una gran cantidad de linfocitos T CD3+, siendo muy escasos los infiltrados de linfocitos B CD20+; además, los linfocitos T CD3+, los macrófagos CD68+ y las células cebadas son, en general, más abundantes en las regiones centrales de las biopsias Resumen 89 estudiadas. En la mayoría de las regiones, se han obtenido correlaciones fuertemente significativas cuando se comparan los linfocitos T y los macrófagos con las células cebadas. También se ha encontrado un aumento significativo de la superficie ocupada por los capilares sanguíneos y linfáticos, en las biopsias de pacientes quemados, con respecto al control. Todos estos datos sugieren una relación de la respuesta de las células inmunocompetentes y de las células cebadas con los procesos de angiogénesis sanguínea y linfática en la dermis de los pacientes quemados. Palabras Clave: Quemaduras, Piel, Inflamación cutánea, Linfocitos, Macrófagos, Células Cebadas, Angiogénesis, Linfangiogénesis. Summary 91 SUMMARY In patients with severe skin burns, clinical and immunological alterations are well known. General histological findings, such as the formation of blisters, necrotic ulcers and coagulative necrosis, associated with nonspecific inflammatory infiltrates, have also been described. However, there are no previous studies on the quantitative distribution of both the immunocompetent cells and the blood and lymphatic vessels in the dermis surrounded the skin ulcer. The relationships between T and B lymphocytes, macrophages and mast cells, as well as the mechanisms of angiogenesis and lymphangiogenesis in the biopsy of the skin of burned patients have not been evaluated. In the present study, 47 cutaneous biopsies were reviewed, 37 corresponding to burned patients and 10 samples of healthy skin. These were evaluated immunohistochemically and the CD3+ T-lymphocytes, CD20+ B-lymphocytes, CD68+ macrophages, and tryptase+ mast cells have been quantified morphometrically; the expression of CD31+ in the endothelial cells of the blood microvasculature and the expression of D2-40+ in the endothelial cells of the lymphatic capillaries were also quantified. In the dermis surrounding the post-burn skin ulcers, 11 correlative regions of 500 μ have been evaluated, being region 1 the area closest to the ulcer and region 11 the most peripheral area of the biopsy. The counting of immunomarked cells was performed directly under the microscope, using a 40x objective; on the other hand, the area occupied by the blood and lymphatic microvessels was calculated, in relation to the area of the dermis of each evaluated region, using the program Image J. The immune response is different in the central area of the burn, (where complete tissue ulceration and necrosis occurs), than in the skin edges surrounding the ulceration. We have evidenced a variable amount of CD68+ macrophages in the periulcerated zone; a large number of CD3+ T-lymphocytes, with very few infiltrates of CD20+ B-lymphocytes was also found; In addition, CD3+ T-lymphocytes, CD68+ macrophages and mast cells are, in general, more abundant in the central areas of the biopsies studied. In most regions, strongly Summary 92 significant correlations have been obtained when comparing T-lymphocytes and macrophages with mast cells. A significant increase in the surface area occupied by blood and lymphatic capillaries has also been found in the biopsies of burned patients, with respect to the control. All these data suggest a relationship between the response of the immunocompetent cells and mast cells with the processes of blood and lymphatic angiogenesis in the dermis of burned patients. Key Words: Burns, skin, cutaneous inflammation, Lymphocytes, Macrophages, Mast Cells, Angiogenesis, Lymphangiogenesis.