Aislamiento de ADN de hongoscomparación de métodos manuales con un nuevo procedimiento semiautomático

Resumen

Las técnicas moleculares se han convertido en una herramienta esencial para la investigación micológica básica y aplicada. Para poder sacar el máximo partido a las posibilidades que ofrecen estas técnicas, resulta esencial el desarrollo de métodos de aislamiento de ADN fúngico que sean simples, de bajo coste, rápidos y repetibles. En este trabajo se compara un sistema semiautomático de aislamiento de ácidos nucleidos con varios protocolos manuales de extracción de ADN de hongos a partir de distintos tipos de muestra: cultivos en placa de hongos filamentosos y levaduras, conidias, micelio seco y muestras de pelo experimentalmente infectado por dermatofitos. La comparación entre los procedimientos manuales y semiautomático se realizó a tres niveles: rendimiento, pureza de los extractos de ADN y tiempo empleado. La calidad del ADN aislado fue también comprobada en reacciones de PRC. El procedimiento semiautomático de extracción de ADN fúngico descrito en este trabajo presenta claras ventajas con respecto a los métodos manuales convencionales: reduce considerablemente el tiempo de manejo, evita el uso de sustancias químicas nocivas, minimiza el riesgo de contaminación cruzada y mejora la repetibilidad del proceso. Estas múltiples ventajas hacen que este procedimiento sea adecuado para su aplicación a las técnicas moleculares utilizadas en los laboratorios de diagnóstico e investigación.