Análisis de las Células de Prolactina (Proliferación y Apoptosis) en Ratones Trasgénicos (Knock Out) para la Aromatasa P450

Resumen

Mediante técnicas inmunohistoquímicas se realizó un estudio planimétrico y morfométrico de las células de prolactina de la pars distalis de la adenohipófisis. En él se observó que existe una distribución general con un patrón diferencial con agrupamientos de unas regiones a otras de la pars distalis de la glándula, independientemente del género y de si el animal estudiado era wild type o knock out . Al realizar el análisis planimétrico, se obtuvo que el porcentaje de células positivas a prolactina en hembras knock out era menor de manera estadísticamente significativa al de wild type, siendo estos porcentajes no uniformes entre regiones. De igual modo, en el estudio de la densidad numérica de células positivas a prolactina en hembras se observó que en knock out era menor de manera estadísticamente significativa al de wild type y que también existían variaciones entre regiones. En el análisis planimétrico en machos, también se obtuvieron diferencias estadísticamente significativas entre los porcentajes de células positivas a prolactina en machos knock out y wild type, siendo los primeros inferiores a los segundos y presentando también una distribución de dichos porcentajes no uniforme entre regiones. De idéntico modo el estudio de la densidad numérica de las células de prolactina en machos knock out y wild type demostró que dicha densidad era menor de manera estadísticamente significativa en los knock out frente a los wild type, existiendo así mismo variaciones entre regiones. En cuanto al análisis morfométrico de las células de prolactina, tanto las áreas celulares como las nucleares para hembras knock out fueron menores de manera estadísticamente significativa a las de las hembras wild type. En machos también hallamos diferencias estadísticamente significativas entre las áreas celulares y nucleares, siendo en ambos casos de menor tamaño las de las células de machos knock out que las de machos wild type. Al comparar las áreas de las células de machos con las de hembras se observó que el área celular era muy similar tanto en wild type como en knock out, mientras que existía un menor tamaño en las áreas nucleares de machos frente a hembras tanto en knock out como en wild type. Los resultados para los porcentajes de células de prolactina en proliferación, positivas a PCNA, mostraron una diferencia estadísticamente significativa entre hembras wild type y knock out, siendo el porcentaje de dichas células muy inferior en las hembras de ratón knock out para aromatasa P450. En machos knock out el porcentaje de células positivas a prolactina fue sensiblemente menor al de machos wild type. No existieron diferencias entre machos y hembras wild type, mientras que estas diferencias fueron estadísticamente significativas entre machos y hembras knock out. Junto a variaciones en el número y el tamaño de las células de prolactina, los animales knock out presentaron variaciones en la forma y los patrones de tinción con respecto a los wild type. En los knock out, las células disminuyen la intensidad de la reacción, dicha reacción no ocupa la totalidad del citoplasma, y en la región medial próxima a la pars intermedia no forman grupos. El trabajo que se presenta es el primer estudio que constata que la ausencia de aromatasa en roedores de edad avanzada impide la aparición de los prolactinomas hipofisarios espontáneos. Lo que sugiere que la sobre-expresión de la aromatasa P450 en edades avanzadas puede ser una causa principal en la génesis de dichos adenomas. La imposibilidad de generar estrógenos por ausencia de aromatasa P450 que acontece en los animales knock out provoca un descenso en el porcentaje de células positivas a prolactina en la hipófisis que es prácticamente idéntico en hembras y machos, esto sugiere que los estrógenos juegan un importante papel en el mantenimiento de la población lactotropa hipofisaria no solo en las hembras sino también en los machos. Este hallazgo es importante ya que demuestra, por primera vez, que fisiológicamente los estrógenos ejercen una regulación estimuladora de la producción de prolactina en los machos, lo que sugiere a su vez que los andrógenos desarrollan una regulación de la población de las células hipofisarias productoras de prolactina a través de su aromatización a estradiol. La ausencia de aromatasa P450 induce un descenso del área celular y del área nuclear de las células positivas a prolactina, en ambos sexos, de una forma parecida. Los cambios observados no afectan por igual a toda la glándula, lo que sugiere que la respuesta a la regulación estrogénica de las células hipofisarias productoras de prolactina no es homogénea. Este estudio demuestra que la aromatización local hipofisaria de los andrógenos a estrógenos, al menos en los machos, es un mecanismo fisiológico de regulación de la proliferación de las células productoras de prolactina.