El factor H del complementocaracterización molecular de una deficiencia familiar y clonación de regiones genómicas 5' no codificantes

Resumen

SE PRESENTA EL TRABAJO REALIZADO EN TORNO A DOS ASPECTOS INDEPENDIENTES DEL FACTOR H DEL COMPLEMENTO: 1. SE HA INVESTIGADO UNA DEFICIENCIA FAMILIAR DE FACTOR H. LOS PACIENTES CARECEN DE LA FORMA PLASMATICA NORMAL Y PREDOMINANTE DE 150 KD, Y EN SU LUGAR PRESENTAN UNA NUEVA VARIANTE TRUNCADA DE 130 KD, AUSENTE DE MUESTRAS NORMALES. TRAS HABER REALIZADO INVESTIGACIONES A LOS NIVELES PROTEICO Y GENICO SE CONCLUYE QUE LA NUEVA VARIANTE ESTA ASOCIADA A PERDIDA DE SECUENCIA CODIFICADORA POR OMISION DE EXONES (EXON SKIPP-PING). 2. SE HA CARACTERIZADO POR SECUENCIACION UN SEGMENTO GENOMICO DE 825 PB QUE CONTIENE EL INICIO DE TRANSCRIPCION DEL LOCUS HUMANO QUE CODIFICA AL FACTOR H (CFHA,3). EL ARNM PRIMARIO HEPATICO CONTIENE UNA REGION 5'NT DE 74 PB. EL PROMOTOR DEL FACTOR H CARECE DE CAJA TATA, PRESENTA UN SITIO DE UNION PARA SPL Y UNA CAJA CCAAT, ASI COMO ELEMENTOS PUTATIVOS INR Y DE RESPUESTA A DIVERSOS FACTORES DE TRANSCRIPCION. 3. EN LA CARACTERIZACION DEL OBJETIVO SEGUNDO SE HA EMPLEADO UN METODO ORIGINAL DISEÑADO A TAL EFECTO Y BASADO EN LA PCR: "PCR CON CEBAMIENTO IMPREDECIBLE (PCR CI)", EL METODO PERMITE EL AISLAMIENTO DE SECUENCIAS GENOMICAS DESCONOCIDAS Y ADYACENTES A CUALQUIER SECUENCIA DESCONOCIDA.