Determinación total y especiación de selenio en materiales biológicos mediante dilución isotópica

Résumé

El selenio es un elemento esencial que juega un papel muy importante en la dieta humana. Sin embargo, la ingesta diaria óptima se encuentra en un estrecho intervalo (50-200 ug.día-1), fuera del cual se pueden presentar distintos desordenes clínicos tanto a estados carenciales como de intoxicación. Algunos estudios sugieren que su deficiencia puede aumentar el riesgo de poder enfermedades coronarias y algunos tipos de cáncer. En este sentido, el consumo de diferentes suplementos de selenio, entre ellos las levaduras selenizadas, han incrementado notablemente. Sin embargo, la biodisponibilidad y toxicidad del elemento depende no sólo de su concentración total sino también de las formas físico-químicas en que se encuentra, por tanto, el objetivo fundametnal de la presente Tesis Doctoral es la puesta apunto de nuevas metodologías analíticas para la determinación total y la expectación de selenio en muestras biológicas de interés clínico y nutricional mediante dilución isotópica y espectrometría de masas. Así, primeramente se puso a punto una metodología analítica para la determinación total de selenio en muestras biológicas mediante el análisis por dilución isotópica en un ICP-MC equipado con celda de colisión/reación. La metodología desarrollada se utilizó para estudiar los niveles de selenio en suero de personas sanas. Posteriormente se puso apunto un método analítico para la especiación cuantitativa de selenio en suero humano empleando la dilución isotópica en su modalidad de adición post-columna, comparando dos tipos de separación cromatográfica: cromatografía de intercambio aniónico y cromatografía de afinidad. La metodología desarrollada se utilizó para estudiar la distribución de selenio entre la proteína séricas en personas sana y pacientes renales con el fin de detectar posibles diferencias entra ambas poblaciones. Por otro lado, se puso a unto un método de análisis por dilución iso