Regulación de la metaloproteasa de matriz de membrana MT1-MMP en células endoteliales humanas

Abstract

Las MMPs juegan un papel muy importante durante la migración celular y la remodelación de la matriz extracelular. En este trabajo, hemos utilizado un modelo in vitro de migración celular así como generado anticuerpos contra el dominio catalítico de MT1-MMP para caracterizar el papel de esta metaloproteasas durante la migración de las células endoteliales. La migración es capaz de inducir la expresión y la actividad de MT1-MMP así como de relocalizar la proteína a estructuras mótiles. Además, los anticuerpos bloquean la migración, invasión y formación de tubos capilares de células endoteliales demostrando el papel que MT1-MMP desempeña durante estos procesos. También estudiamos como las distintas matrices extracelulares pueden regular a MT1-MMP. Así demostramos que MT1-MMP se relocaliza a las zonas de contacto de células endoteliales sobre matrices tipo colágeno tipo 1, fibronectina, ó fibrinógeno. En esta nueva localización, MT1-MMP es incapaz de internalizarse y su actividad esta impedidad de modo dependiente de la activación de RhoA por estas matrices. Además vemos que MT1-MMP se internaliza en células endoteliales mayoritariamente por la vía de las caveolae y que este tráfico se requiere para su correcta localización en estructuras mótiles, para su actividad degradativa así como para sus funciones en migración y en formación de tubos. Finalmente, hemos demostrado como MT1-MMP esta implicado en la angiogenesis inducida por quimioquinas como CCL2 ó CXCL8. Así, la ausencia de MT1-MMP en ratones deficientes impedía la formación de nuevos tubos inducida por CCL2 ó CXCL8. Estas quimioquinas además son capaces de inducir la actividad y el agrupamiento de MT1-MMP de modo dependiente de la polimorización de actina así como de la activación de Rac y P!3K. Por tanto, este trabajo resume el papel que MT1-MMP desempeña en las células endoteliales durante procesos angiogénicos.