Polen del olivo (Olea Europea) estudio de sus antígenos principales, caracterización físico-química y su reactividad biológica

Resumen

DEL ANALISIS DEL EXTRACTO CRUDO DE OLEA EUROPEA SE DESPRENDE QUE SON MEZCLAS COMPLEJAS DE PROTEINAS, DE LAS CUALES LOS COMPONENTES DE 17 Y 19 KD SON LOS MAS REPRESENTATIVOS DESDE UN PUNTO DE VISTA CUANTITATIVO, SUPONIENDO MAS DEL 40% DEL MATERIAL PROTEICO. LAS PROTEINAS QUE COMPONEN EL EXTRACTO SON EN SU MAYORIA DEBILMENTE ACIDAS CON PI ENTRE 4 Y 6,5 PH. LOS COMPONENTES DE 17 Y 19 KD SE DIFERENCIAN POR TECNICAS DE UNION DE CONCANAVALINA-A. EL COMPONENTE DE 19 KD SE TIÑE INTENSAMENTE DENOTANDOSE SU NATURALEZA GLICOPROTEICA MIENTRAS EL DE 17 KD NO SE TIÑE. SE UTILIZARON DOS TECNICAS DIFERENTES PARA EL ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ALERGENICA. POR INMUNODECCION SOBRE EL EXTRACTO UNIDO A CELULOSA, PREVIAMENTE SOMETIDO A PAGE-SDS, LOS COMPONENTES QUE MAYOR FRECUENCIA REACCIONAN CON IGE DE 22 SUEROS DE PACIENTES SENSIBILIZADOS A O. EUROPEA SON LOS DE 19, 17, 42, 39 Y 28 KD CON FRECUENCIAS DE 87%, 76%, 59%, 55% Y 55% RESPECTIVAMENTE. LOS ANTIGENOS DE 17 Y 19 KD SON ANTIGENOS PRINCIPALES POR ESTE METODO. LOS ARCOS 1 Y 5 DETECTADOS POR CRIE REACCIONAN CON TODOS LOS SUEROS PROBADOS PUDIENDOSE CONSIDERAR COMO ALERGENOS PRINCIPALES. SE OBTUVIERON ANTICUERPOS MONOCLONALES, UTILIZANDO COMO AGENTE INMUNIZANTE EXT. CRUDO DE O. EUROPEA. LOS ANTICUERPOS ASI OBTENIDOS REACCIONAN CON DOS BANDAS PROTEICAS DE 17 Y 19 KD POR TECNICAS DE INMUNOTRANSFERENCIA. EL ANTICUERPO MONOCLONAL OL 1 COMPITE CON LA IGE ESPECIFICA DE SUEROS DE INDIVIDUOS SENSIBILIZADOS A O. EUROPEA, PARA LA UNION DE EPITOPOS DE LOS ANTIGENOS EN PRUEBA DE RAST. SE FRACCIONO EL EXTRACTO POR CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO IONICO OBTENIENDOSE LAS FRACIONES I Y II DE LAS QUE SE AISLAN LOS ANTIGENOS OLE.E.I Y OLE.E.II, DE CARACTERISTICAS FISICOQUIMICAS E INMUNOLOGICAS DIFERENTES, COMPORTANDOSE AMBOS COMO ALERGENOS PRINCIPALES. OLE.E.I ES UNA MOLECULA DE 38 KD, 5,3 DE PI, ALERGENO PRINCIPAL POR RAST INHIBICION QUE REACCIONA CON ACMO OL-1. OLE.E.II DE 10 KD, 3,6 DE PI Y ALERGENO MAYOR