Estudio de la regulación del gen de la colagenasa intersticial de rata (MMP-13) por la interleuquina-6

Resumen

La interleuquina-6 (IK-6) es una citoquina que participa en los procesos inflamatorios desencadenados por el daño tisular. La reparación del tejido, subsecuente al daño, incluye la remodelación de la matriz extracelular (MEC) en el área dañada. Esta remodelación supone la degradación de los componentes de la matriz preexistente (por parte de las metalopretasas) y la síntesis de nuevas moléculas. No existían datos concluyentes sobre el papel de la IL-6 en la remodelación de la MEC. En este trabajo se analizó la regulación de una metaloproteasa, la colagenasa intersticial, por la IL-6 en cultivos de fibroblastos de rata de la línea Rat2. La IL-6 (20 ng/ml) aumentó la expresión del gen de la colagenasa intersticial de rata a partir de 6 horas de tratamiento y el máximo se alcanzó a las 24 horas. Igualmente la IL-6 aumentó la producción de colagenasa, de 60 Kda, y su secreción a los medios de cultivo. En paralelo al aumento de la expresión del gen hallamos que la IL-6 induce la actividad de un fragmento del promotor de la colagenasa de 2000 pares de bases. El análisis mutacional mostró que el sitio AP-1, situado entre las posiciones -19 y -42 en este promotor, determina la respuesta a la IL-6. La IL-6 aumentó el grado de unión del factor AP-1 a su secuencia consenso. Cuando se analizó el papel de la IL-6 en la regulación de las proteínas que forman el factor AP-1 hallamos que la IL-6 induce los ARNm de c-Jun y c-Fos, la actividad de sus promotores y los niveles intracelulares de estas dos proteínas. Asimismo el tratamiento con la IL-6 supuso un aumento de los niveles de c-Jun fosforilado en la serina-63. Esta fosforilación determina la actividad del factor AP-1 y está mediada por la quinasa N-terminal de Jun (JNK). Paradójicamente la IL-6 no indujo la actividad JNK. Cuando se valoró la participación de otras quinasas de serina/treonina como PKC, PKA 6 quinsas dependientes de clamodulina, hallamos que tampoc