Mecanismo de acción antiinflamatoria de 5-O-desmetilnobiletina y derivados del catalpol en hipersensibilidad retardada.

Resumen

RESUMEN La presente Tesis Doctoral se ha centrado en el estudio de 5-O-desmetilnobiletina (DMN), aislado de Sideritis tragoricanum sp. mugronensis, y los iridoides derivados del catalpol denominados escrovalentinósido (SV) y escropoliósido A (SC), aislados de Scrophularia auriculata sp. valentina. La selección de estos tres principios se basó en los estudios previos realizados en los cuales se demostraron las propiedades en modelos experimentales de inflamación aguda. Como métodos experimentales in vivo se han desarrollado nuevos protocolos de inflamación aguda y crónica en ratón, como edema agudo en pata de ratón inducido por carragenina y fosfolipasa A2 (PLA2) y dermatitis en oreja de ratón inducida por aplicación repetida de 13-acetato de 12-O-tetradecanoilforbol (TPA). También se han desarrollado protocolos de hipersensibilidad retardada (DTH) inducida por oxazolona, dinitrofluorobenceno (DNFB) y eritrocitos de cordero (SRBC). En paralelo se han desarrolado diferentes técnicas in vitro para establecer el posible mecanismo de acción de los compuestos estudiados, entre las cuales destacamos la determinación de la citotoxicidad, inhibición de la producción de nitritos, prostaglandina E2, leucotrieno B4 (LTB4), así como de las enzimas que los liberan, interleucinas (IL), factor de necrosis tumoral (TNF) e interferón (IFN) en células aisladas. También se han desarrollado cultivos celulares de macrófagos RAW 264.7, neutrófilos y linfocitos humanos. Entre los resultados y conclusiones más destacables se pueden citar: A) DMN tiene propiedades antialérgicas en diferentes modelos experimentales de DTH, reduciendo la inflamación y la proliferación de linfocitos, afectando principalmente a la evolución del ciclo celular. Su efecto antiproliferativo está mediado por la inhibición de IL-1?, IL-4, TNF-?, IFN-?, y especialmente IL-2. Además, DMN incrementa la producción de la citocina antiinflamatoria IL-10. La actividad antiinflamatoria in vivo se justifica por su efecto sobre el metabolismo del ácido araquidónico, disminuyendo la liberación de LTB4 por inhibición directa de la 5-LOX. B) SV y SC poseen propiedades antiinflamatorias frente a reacciones de DTH, inhibiendo la proliferación linfocitaria y la liberación de IL-1?, IL-2, IL-4, TNF-?, y especialmente IFN-?. SC inhibe la activación del NF-?B, lo que justifica la inhibición de la expresión de las enzimas óxido nítrico sintasa inducible (iNOS) y ciclooxigenasa-2 (COX-2). En el caso de SV dicho factor de transcripción no está directamente implicado, si bien también disminuye la actividad de las mencionadas enzimas proinflamatorias. __________________________________________________________________________________________________