Estudio comparativo de la amplificación de ácidos nucleicos mediante técnicas de pcr, a partir de material crioconservado e incluido en parafina, de sarcomas humanos

Resumen

Algunos sarcomas de alto grado pueden presentarse como tumores pobremente diferenciados sin rasgos fenotípicos distintivos, lo cual puede plantear serios problemas de diagnóstico diferencial. La técnicas moleculares pueden proporcionar nuevos factores complementarios al diagnóstico y diagnóstico diferencial aplicables en un laboratorio de Anatomía Patológica. De esta forma, se ha boservado que la t(11;22) aparece en el 95% de los sarcomas de la familia Ewing y la t(X;18) se ha asociado a un 90% de los sarcomas sinoviales. En nuestro trabajo de investigación nos hemos planteado estudiar ARN procedente de material crioconservado y material en parafina aplicando técnicas moleculares con el objetivo de apoyar el diagnóstico histopatológico en sarcomas humanos, concretamente hemos estudiado sarcomas sinoviales y sarcomas de la familia Ewing. Entre los objetivos de este trabajo figuraban la recuperación de ácidos nucleidos de tejido archivado en bloques de parafina para la realización de estudios retrospectivos amplios con métodos sensibles de biología molecular y establecer procedimientos rutinarios de extracción de ácidos nucleicos en el laboratorio de Anatomía Patológica. Se han estudiado: 48 Sarcomas Sinoviales, 92 Sarcomas de la Familia Ewing y 29 corresponden a otros tumores. En primer lugar se realiza un estudio histopatológico y a continuación la determinación de las fusiones moleculares SYT-SSX y EWS-FLI1 a partir de ARN obtenido de 169 bloques de parafina. Destacan de los resultados que en el grupo de tumores en el que se analizó ARN de tejido crioconservado y ARN de tejido conservado en parafina, se obtienen resultados similares para la fusión SYT-SSX mientras que el rendimiento para la fusión EWS-FLI1 es mucho menor para el estudio de material incluido en parafina (de un 50% a un 100%) y en material procedente de parafina se obtuvo: en los sarcomas sinoviales amplificación de los transcritos de fu