Papel de hemo oxigenasa-1 en la artritis inducida por transferencia de suero k/bxn. Caracterizacion del modelo experimental

Resumen

La Artritis Reumatoide (AR) es una enfermedad sistémica, crónica y de carácter autoinmune que produce daño articular en los pacientes. El estudio de la patogenia y del tratamiento de la AR se desarrolla en gran medida sobre modelos animales de artritis experimental. En la actualidad existen varios modelos de artritis en ratón ampliamente utilizados, pero poseen algunas limitaciones. En la primera parte de esta tesis, se ha realizado un estudio para adaptar el modelo de artritis por transferencia de suero K/BxN a un modelo cronificado. Esto nos permite estudiar las características fisiopatológicas de este proceso en su fase más tardía en ratones wild type y en ratones modificados genéticamente, así como analizar distintas dianas terapéuticas para el tratamiento de la enfermedad. La adaptación de este modelo se realizó ampliando el modelo inicial, realizando cinco inmunizaciones periódicas. Con esto conseguimos mantener elevados los mediadores inflamatorios propios de dicha enfermedad y los signos característicos del proceso artrítico mimetizando la patogenia de la AR. En la segunda parte de la tesis se estudia la participación de la enzima hemo oxigenasa-1 (HO-1) en la regulación de la AR. Esta enzima HO-1 posee propiedades citoprotectoras, antioxidantes y antiinflamatorias. Por ello, decidimos estudiar el papel de HO-1 en la fase efectora de la artritis experimental. Para ello, trabajamos con el modelo clásico de artritis experimental por transferencia de suero K/BxN. Los animales utilizados fueron ratones Knockout (KO) para la enzima HO-1 (HO-1-/-) y ratones heterocigóticos (HO-1+/-). En contra de la idea inicial, los ratones que mostraban mayor severidad en la patogenia de la artritis a nivel macroscópico fueron los ratones heterocigóticos y el estudio histológico confirmó estos datos. La heterocigosis provocó una intensa respuesta inflamatoria articular que estaría relacionada con un aumento de los niveles de CXCL-1 y de la migración leucocitaria, mientras que la homocigosis determinó una mayor respuesta inflamatoria sistémica. Continuamos los estudios sobre la actividad de esta enzima en células mieloides. Para ello utilizamos ratones KO condicionales (HO-1KO-M) incapaces de expresar HO-1 pero únicamente en las células procedentes de la línea mieloide. Realizamos un primer estudio de la implicación de HO-1 en el proceso inflamatorio mediado por dichas células, trabajando con un modelo sencillo de inflamación aguda conocido como “bolsa de aire en ratón”. En los resultados obtenidos, pudimos comprobar que los ratones HO-1KO-M mostraban niveles más elevados de migración leucocitaria y de los mediadores inflamatorios principales (IL-1β, TNFα, MMP-3, PGE2). Una vez comprobada la implicación de HO-1 mieloide en la regulación de un proceso inflamatorio agudo, estudiamos la influencia de esta deleción en la línea mieloide en el modelo de artritis por transferencia de suero K/BxN, donde la regulación de la inflamación depende de la influencia de una gran variedad de factores. Con este objetivo, desarrollamos el modelo artrítico K/BxN en los ratones HO-1KO-M. El resultado fue una artritis caracterizada por un aumento en la osteoclastogénesis y en la formación de osteofitos en los ratones HO-1KO-M.