Detección mediante microscopía electrónica ambiental y confocal de biopelículas bacterianas en otitis media experimental y materiales implantados

Résumé

Determinadas variedades de otitis media continúan hoy siendo un problema clínico relevante debido a la escasa respuesta a los tratamientos médicos actuales y a su tendencia a la cronicidad. La otitis media serosa, la otitis media aguda de repetición, la otitis media crónica o el fracaso de biomateriales utilizados como prótesis en el oído son sólo algunos ejemplos. Diversos factores clásicos como determinados trastornos anatómicos, genéticos o alérgicos han sido relacionados con su elevada prevalencia. En los últimos años ha tomado especial importancia la detección de comunidades bacterianas embebidos de una matriz extracelular de polisacáridos que viven adheridos a tejidos vivos o inertes. Estas estructuras, llamadas biopelículas, se caracterizan por su extraordinaria capacidad de resistencia, frente a cambios medioambientales hostiles o frente a fármacos antibacterianos, y por ser difíciles de detectar utilizando los métodos microbiológicos estándar. El uso de técnicas microbiológicas y la visualización mediante microscopio confocal láser de barrido (MCLB) y el microscopio electrónico de barrido ambiental (MEBA) de ratas Wistar, a las que se indujo una disfunción tubárica, y que fueron inoculadas con una solución de Pseudomonas aeruginosa, constituye un modelo fiable y válido para el estudio y detección de biopelículas bacterianas. Además, este modelo permite realizar un estudio cronológico y topográfico del desarrollo y complejidad de las biopelículas bacterianas en los tejidos biológicos del oído y sobre biomateriales implantados. En este trabajo, la implantación de fragmentos de titanio e hidroxiapatita, materiales más utilizados en el oído medio, mostró una mayor tendencia a la colonización en la hidroxiapatita frente al titanio, aunque en ambos casos el biomaterial mostró una menor colonización que la mucosa ótica de la rata. El MEBA, utilizado habitualmente en la industria, ha sido introducido por nuestro grupo en el ámbito sanitario para la detección de biopelículas. Permite el estudio de tejidos biológicos en fresco sin ningún procesamiento y sin deshidratar las muestras, observando las mismas en su estado natural. Además, ofrece imágenes de alta resolución de la matriz extracelular de las biopelículas, envoltura responsable en gran medida de la capacidad de resistencia de estas organizaciones bacterianas. Por tanto, se trata de una herramienta que aporta información complementaria a la ofrecida por otros métodos de detección de biopelículas como el MCLB.