Estudio de la eficacia antiviral frente al VIH de la proteina de fusión CD4-toxina diftérica DAB389CD4 y análisis de su mecanismo de inmunodepresión

Résumé

DAB389CD4 es una inmunotoxina en la que se ha sustituido el dominio receptor de la toxina diftérica por los dominios D1 y D2 del CD4 humano, de forma que la proteína resultante elimina selectivamente las células infectadas por el VIH, ya que el dominio 1 de CD4 interacciona con la proteína de la envuelta del VIH, gp120, la cual se expresa en la membrana de las células infectadas por el virus. En la presente Tesis Doctoral se describe la actividad antiviral frente al VIH de DAB389CD4 y también se describe el mecanismo de inmunosupresión de la inmunotoxina. En la Tesis se demuestra que DAB389CD4 tiene una actividad anti-VIH muy potente en linfocitos aislados de pacientes con SIDA, en los cuales erradica las células infectadas pro el VIH de forma selectiva. También se demuestra que DAB389CD4 es activa frente a macrófagos infectados por el VIH y que no es tóxica para es población celular, describiéndose también que existe un fuerte efecto sinérgico entre DAB389CD4 y el inhibidor de la protesa del VIH Ritonavir. También hemos analizado la eficacia antiviral de DAB389CD4 en el modelo animal hu-PBL-SCID y observamos que la inmunotoxina disminuye la carga viral del VIH en los ratones infectados. Cuando hemos estudiado el efecto de DAB389CD4 en la activación linfocitaria observamos que DAB389CD4 tiene un efecto inmunosupresor in vitro cuando los linfocitos son activados a través del complejo TCR-CD3 debido a la inhibición de la producción de Interleuquina 2 en el cultivo. Finalmente, demostramos que DAB389CD4 tiene una conformación dimérica en solución que le permite interaccionar in vitro con moléculas HLA de clase II con mayor afinidad que las formas solubles de CD4 y este hecho explicaría el efecto inmunosupresor descrito..