Señalización coestimuladora mediada por el regulador de complemento Crry/p65 en linfocitos Th2

Resumen

Crry/p65 es una glicoproteína de tipo I perteneciente a la familia de proteínas reguladoras de la activación del complemento, y la máxima responsable de la protección de las células T de ratón frente al ataque del complemento autólogo. Previamente este laboratorio mostró que Crry coestimula linfocitos T CD4+ de ratón in vitro, incrementando la proliferación y secreción de IL4 y dirigiendo el desarrollo hacia fenotipo Th2. Hemos analizado la señalización intracelular mediada a través de Crry en la línea celular Th2 SR.D10. La coestimulación por Crry incrementa la señalización disparada por el TCR incluyendo la fosforilación de p56lkc, ZAP-40, Vav-1 y AKT, así como la inducción de la polimerización de actina y la activación de la MAPK ERK dependientes de P!3K. Crry también incrementa la ruta JNK dependiente de coestimulación, pero no la de la MAPK p38. Estas señales incrementan la respuesta efectora de las células SR.D10 de fenotipo Th2 aumentando la producción de IL4 e IL5, no así la de IL10 en las condiciones empleadas. Además una fracción de Crry colocaliza con GM-1 y está presente en la fracción insoluble en detergentes no iónicos (DIGs). La unión de Crry por un anticuerpo monoclonal específico incrementa la presencia de Crry en los DIGs , y la coestimulación por Crry induce la agregación de rafts lipídicos y la polimerización de actina en los puntos de activación, incrementando la presencia de CD3e u p56lkc fosforilada en los rafts. Para analizar el papel del dominio citoplasmático de Crry, no requerido para su función reguladora de complemento, hemos generado células th2 deficientes en Crry, que han sido transfectadas con proteínas completas o deleccionadas en su dominio citoplasmático. La mutación de delección no afecta significativamente su efecto sobre la fosforilación de p86lck, ZAP-70, AKT, Vav-1 o ERK. Al igual que las formas completas, las formas truncadas de Crry inducen la