Propiedades cinéticas y mecanismo de reacción de la malato deshidrogenasa citoplasmática de micelio de Phycomyces blakesleeanus

Résumé

Se ha purificado la malato deshidrogenasa citoplasmatica de micelio de phycomyces blakesleeanus nrrl 1555(-). La enzima tiene un p.M. De 67.500 y se compone de dos subunidades identicas caracterizandose como una l(+)mdh dependiente de nad elevado a +. Presenta inhibicion por oaa y l-malato dependiente del ph y de la concentracion de la coenzima en ambos casos. La inhibicion por sustrato es compatible con una inhibicion competitiva por formacion de complejos abortivos binarios e-oaa y e-malato. El mecanismo de reaccion se ajusta a un mecanismo ordenado bi-bi. Los valores de las constantes cineticas de velocidad de las etapas individuales de reaccion parecen indicar que la disociacion de la coenzima de los complejos e-nadh y e-nad pueden constituir la etapa limitante en cada sentido de la reaccion si bien no se puede descartar la existencia de cambios conformacionales enzima-coenzima anteriores a la propia disociacion de la coenzima que constituyan la etapa limitante.