Análisis de la expresión del gen de la calcitonina y de las isoformas c1a y c1b del receptor de la calcitonina en el desarrollo embrionario del sistema nervioso central de la rata

Resumen

El trabajo realizado en esta tesis ha consistido en el análisis espacio temporal de la expresión del gen de la calcitonina, a través de su mRNA alternativo para la procalcitonina, y de las isoformas C1a y C1b del gen del receptor de la calcitonina en el embrión de rata entre los días 11 y 18 de gestación. El estudio se ha realizado utilizando técnicas de biología molecular y morfológicas, como la RT-PCR, la Técnica de Protección a la Ribonucleasa, la Hibridación in situ con ribosondas marcadas radiactivamente, las técnicas inmunohistoquímicas y las técnicas de transgénesis. Los resultados muestran que hay expresión de procalcitonina entre los días 11 y 18, aunque dicha expresión cambia su ubicación al avanzar el desarrollo, teniendo lugar en la primera mitad de este periodo en áreas dorsales del SNC, para aparecer después en células de la microglía. El receptor de la calcitonina se expresa (ambas isoformas) desde el día 14 postcoitum a lo largo del eje antero-posterior del SNC, teniendo una especial relevancia la isoforma C1b, específica del tejido nervioso, a partir del día 15-16 en las áreas más rostrales. Se ha generado un ratón transgénico que sobreexpresa calcitonina en áreas dorsales del tubo neural entre los días 9,5 y 11,5 del desarrollo. El análisis de este animal está todavía en curso y se presentan los hallazgos obtenidos hasta el momento. Del análisis de los resultados deducimos que la expresión de calcitonina entre los días 11 y 14 en áreas dorsales del SNC puede estar inhibiendo la expresión de CTR y a su vez atrayendo macrófagos que colonizarán el parénquima nervioso para dar lugar a los elementos de la microglía, mientras que la calcitonina producida en los días posteriores por los propios elementos de la microglía sería una fuente para el receptor de calcitonina de neuronas de áreas próximas. Otros lugares de expresión de procalcitonina como la placa del suelo del tubo neural pueden estar implic