Caracterización de los mecanismos de metilación y eflujo implicados en la resistencia a antibióticos mls

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HEMOS ESTUDIADO LA RESISTENCIA A ANTIBIOTICOS MLS EN 58 CEPAS DE ESTREPTOCOCOS: 36 DE ESTREPTOCOCOS BETA-HEMOLITICOS Y 22 ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO VIRIDANS. LOS FENOTIPOS MLS SE DETERMINARON ESTUDIANDO LA SENSIBILIDAD A MACROLIDOS DE 14, 15 Y 16 ATOMOS, CLINDAMICINA, VIRGINIAMICINA Y PRISTINAMICINA POR EL METODO DE DIFUSION EN AGAR. EN LA MAYORIA DE LAS CEPAS RESISTENTES A ERITROMICINA HEMOS DETECTADO UN PATRON DE RESISTENCIA DISOCIADA 14MMR-15MMR-16MMS-LS-SS. EL MECANISMO DE RESISTENCIA A ERITROMICINA MAS ESTUDIADO Y MEJOR CONOCIDO ES LA MODIFICACION DEL SITIO DIANA DEBIDO A LA ACCION DE UNA FAMILIA DE ENZIMAS, LAS METILASAS, QUE IMPIDEN EL ACCESO DEL ANTIBIOTICO A SU SITIO DE UNION EN EL RIBOSOMA. LA METILACION DA LUGAR AL FENOTIPO DE RESISTENCIA MLSB. AUNQUE EL FENOTIPO DE RESISTENCIA MLSB FUE IDENTIFICADO EN PRIMER LUGAR EN AISLADOS CLINICOS DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS, EN LA ACTUALIDAD SE HAN CARACTERIZADO UN GRAN NUMERO DE GENES QUE CODIFICAN METILASAS TANTO EN MICROORGANISMOS GRAM-POSITIVOS COMO GRAM-NEGATIVOS. A ESTOS GENES SE LES DENOMINA USUALMENTE ERM, Y EN LOS ESTREPTOCOCOS SE HA ENCONTRADO LA VARIANTE ERMAM. PARA LA DETECCION DE GENES ERM SE UTILIZO LA REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA CON OLIGONUCLEOTIDOS DEGENERADOS. PARA CLASIFICAR EL PRODUCTO DE LA PCR SE REALIZARON HIBRIDACIONES CON SONDAS ERM ESPECIFICAS. SOLAMENTE FUE ENCONTRADO UN TIPO DE GEN ERM EN TODAS LAS CEPAS QUE DIERON POSITIVA LA PCR: ERMAM. UN SEGUNDO TIPO DE RESISTENCIA A ANTIBIOTICOS MLSB ES CONSECUENCIA DE LA INACTIVACION DEL ANTIBIOTICO DEBIDA A LA EXISTENCIA DE VARIOS TIPOS DE ENZIMAS INACTIVANTES. ESTAS ENZIMAS SE HAN DETECTADO PRINCIPALMENTE EN LA FAMILIA ENTEROBACTERIACEAE Y HASTA LA FECHA, NINGUNA FORMA DE INACTIVACION HA SIDO DETECTADA EN ESTREPTOCOCOS. EL ESTUDIO DE LA INACTIVACION ENZIMATICA SE REALIZO MEDIANTE EL ENSAYO MICROBIOLOGICO DESCRITO POR LAMPSON ET AL. EN NINGUNA DE LAS CEPAS ESTUDIADAS LA RESISTENCIA A ERITROMICINA ERA