Aislamiento y análisis del RNA de mitocondrias y sinaptosomas de cerebro de mamíferos

Resumen

EN ESTE TRABAJO SE HA ABORDADO EL ESTUDIO DEL CONTENIDO DE RNA DE LAS MITOCONDRIAS Y SINAPTOSOMAS DE CEREBRO DE MAMIFEROS, COMO PRIMER PASO PARA EL ANALISIS DEL PROCESO DE TRANSCRIPCION MITOCONDRIAL EN ORGANOS DE MAMIFEROS. PARA ELLO, SE HAN AISLADO Y PURIFICADO EN GRAN ESCALA LAS MITOCONDRIAS Y SINAPTOSOMAS POR PARTICION EN BIFASES ACUOSAS, SE HAN AISLADO LOS ACIDOS NUCLEICOS POR EXTRACCION CON FENOL Y SE HAN ANALIZADO EN GELES DE ATAROSA-HIDROXIDO DE METIL MERCURIO, DESPUES DE SU FRACCIONAMIENTO POR OLIGO(DT)-CELULOSA. LA FRACCION DE POLI(A)-RNA ESTA FORMADA POR UNAS 14 ESPECIES DE RNA CON UN TAMAÑO QUE VARIA ENTRE 300 Y 7100 NT, QUE SE CORRESPONDEN CON EL TAMAÑO DEDUCIDO DE LA SECUENCIA DEL DNA. LOS PERFILES ELECTROFORETICOS DEL POLI(A)-RNA DE MITOCONDRIAS LIBRES, SINAPTOSOMAS Y MITOCONDRIAS SINAPTICAS SON PRACTICAMENTE IDENTICOS INDICANDO QUE TODAS LAS ESPECIES DE POLI(A)-RNA DE SINAPTOSOMAS SON DE ORIGEN MITOCONDRIAL. LA PREPARACION DE RNA DE MITOPLASTOS DONDE SE HA ELIMINADO TODA CONTAMINACION CON RNA CITOPLASMICO, CORROBORA ESTA CONCLUSION. MEDIANTE ESTE ANALISIS SE HA PODIDO DETERMINAR QUE EN SINAPTOSOMAS OVINOS NO EXISTE UNA SINTESIS DE PROTEINAS DE ORIGEN NO MITOCONDRIAL. ESTO DE PROTEINAS DE ORIGEN NO MITOCONDRIAL. ESTO SE CORROBORO POR EL ANALISIS DE SINTESIS DE PROTEINAS EN SINAPTOSOMAS COLINERGICOS PUROS. SE HAN ANALIZADO ASIMISMO, LOS PEPTIDOS DE ORIGEN MITOCONDRIAL DE LOS SINAPTOSOMAS Y LOS DE ORIGEN CITOPLASMICO PRODUCIDOS POR LA CONTAMINACION DE LOS SINAPTOSOMAS CON OTRO TIPO DE PARTICULAS.