Estudio clínico y preclínico de la expresión génica y proteica de mal y mal2 en adenocarcinoma prostático. Valor diagnóstico y pronóstico

Resumen

INTRODUCCIÓN El Cáncer de Próstata (CaP) es la neoplasia sólida masculina más común en mayores de 70 años en Europa y la segunda causa de muerte en hombres. Se considera uno de los problemas médicos más importantes a los que se enfrenta la población masculina en la actualidad. Además de la importancia de realizar una detección temprana del CaP, es fundamental estadificar, pronosticar y monitorizar los tumores de próstata clínicamente significativos en estadío temprano, con el objetivo de reducir la mortalidad debida a CaP y mantener una calidad de vida aceptable. En muchas ocasiones, las herramientas diagnósticas tradicionales, no son suficientes para establecer un diagnóstico correcto y predecir la evolución del CaP, por lo que en actualidad se están desarrollando nuevos biomarcadores con esta finalidad. Las proteínas MAL y MAL2 son los miembros mejor caracterizados de la familia MAL que está formada por 8 proteínas con similitudes en su secuencia primaria que comparten propiedades bioquímicas. En células epiteliales polarizadas MAL y MAL2 forman parte de la maquinaria intracelular de transporte de proteínas. MAL juega un papel esencial en los mecanismos de transporte de proteínas a través de una ruta directa hacia la membrana apical desde el aparato de Golgi. Por otra parte, MAL2 es crucial para el transporte apical por la ruta indirecta o transcitótica consistente en transportar proteínas desde la membrana basolateral a la apical. La transformación oncogénica de las células epiteliales frecuentemente conlleva asociada la pérdida de la polaridad celular lo que afecta a la distribución y localización de MAL y MAL2. Basándose en estos hechos, en los últimos años se han realizado estudios para valorar si estas estas proteínas pudieran tener utilidad como biomarcadores con valor diagnóstico y pronóstico en cáncer de páncreas, esófago y mama, carcinoma de ovario y también en ciertos linfomas. HIPÓTESIS La hipótesis de partida es que los cambios en la expresión de las proteínas MAL y MAL2 en las células epiteliales de los acinos prostáticos en el CaP podrían estar relacionados con la aparición, grado de agresividad y progresión del tumor, así como tener valor predictivo sobre la recurrencia bioquímica en los pacientes que lo padecen. OBJETIVO El objetivo principal de este trabajo es estudiar las variaciones que se producen en la expresión proteica y génica de MAL y MAL2 en el CaP en modelos clínicos y preclínicos y establecer si podrían ser utilizados como posibles biomarcadores con poder diagnóstico y pronóstico. MATERIAL Y MÉTODOS Se realizó una evaluación mediante inmunohistoquímica y cuantificación estereológica de los niveles de expresión proteica de MAL y MAL2, así como el perfil transcripcional de los genes de dichas proteínas en pacientes con CaP sobre 51 muestras de adenocarcinoma prostático procedentes de prostatectomías radicales, utilizado como controles 22 próstatas obtenidas a partir de autopsias realizadas a hombres adultos sanos que fallecieron en accidentes de tráfico y que no habían padecido enfermedades endocrinas ni relacionadas con el sistema reproductor. Se creó una base de datos, con las variables edad, niveles de PSA al diagnóstico, puntuación de Gleason de la biopsia prostática, grupos de riesgo clínico según criterios D’Amico, resultado de anatomía patológica de la pieza quirúrgica, existencia de márgenes quirúrgicos positivos, invasión perineural y valoración de la presencia de recidiva bioquímica tras la cirugía con 2 años de seguimiento. El análisis estadístico de los resultados se realizó con el programa estadístico IBM SPSS Statistics Versión 22 y el programa GraphPad Prism 7.0a para la realización de gráficas. Se utilizaron los test no paramétricos U Mann-Whitney y Kruskal-Wallis con las siguientes correcciones post-test Bonferroni-Dunn y corrección de Welch, según se indica. Además, se utilizó regresión lineal para los parámetros cuantitativos PSA y edad. Se consideró p<0,05 como estadísticamente significativa. RESULTADOS Nuestros resultados evidencian una disminución significativa de MAL en los casos tumorales con respecto al control, viéndose más disminuidos en aquellos casos con indicadores de peor evolución de la enfermedad. Por otro lado, en general, no se observaron cambios significativos de MAL2, exceptos en algunos casos relacionados con mayor agresividad del tumor. CONCLUSIONES Los resultados obtenidos en la presente tesis apoyan la determinación de MAL como una herramienta adicional de diagnóstico y pronóstico a las actualmente utilizadas (PSA, TNM clínico, Gleason).