Estrategias de multimerización para la generación de anticuerpos recombinantes con utilidad diagnóstica y terapéutica

Resumo

En este proyecto se generaron varios tipos de agentes multivalentes y multifuncionales, integrando anticuerpos recombinantes, en formato monocadena (scFv), en armazones proteicos derivados de la proteína III del bacteriófago (scFv-DI/DII) o derivados del dominio NC1 del colágeno XVIII (scFv-NC1) murino. La fusión con el DI indujo la multimerización efectiva del scFv, que fue expresada por células eucarióticas genéticamente modificadas, en forma funcionalmente activa. La expresión in situ de esta proteína de fusión indujo una respuesta inmunológica específica de tipo Th1, demostrando su potencial en protocolos de inmunoterapia activa. A partir de regiones derivadas del dominio NC1, se generaron dos tipos de agentes: i) mediante la fusión de un scFv con la región de trimerización del dominio NC1, se generó un anticuerpo trimérico (¿Trimerbody¿) con propiedades funcionales y físico-químicas superiores a las del scFv monomérico; y ii) mediante la fusión de un scFv, con actividad antiangiogénica, con el domino NC1 completo, que incluye el inhibidor endógeno de angiogénesis endostatina, se generó un reactivo multivalente y multifuncional con mayor actividad antiangiogénica, tanto in vitro como in vivo.