Purificación y propiedades de las actividades PI-PLC mayoritarias presente en membrana y citoplasma de bazo humano

Abstract

SE HAN PURIFICADO DOS ACTIVIDADES PI-PLC ESPECIFICAS A PARTIR DE BAZO HUMANO. LA ACTIVIDAD PI-PLC DE MEMBRANA REPRESENTA LA ACTIVIDAD MAYORITARIA PRESENTE EN LA MEMBRANA, MIENTRAS LA PI-PLC CITOPLASMATICA ES LA ACTIVIDAD MAYORITARIA DEL CITOPLASMA. LA PI-PLC DE MEMBRANA PUEDE SER RESUELTA EN DOS PICOS DE ACTIVIDAD DE ALTO (45-60 KD) Y BAJO (13-18 KD) PESO MOLECULAR. ALTAS CONCENTRACIONES DE (NH4)2 SO4 2M DISOCIAN LA FORMA DE ALTO PESO MOLECULAR DANDO LUGAR A LA FORMA DE BAJO PESO MOLECULAR, CON UN AUMENTO DE LA ACTIVIDAD ESPECIFICA, LO QUE SUGIERE LA ASOCIACION DEL ENZIMA CON UNA PROTEINA REGULADORA. EN ENZIMA PLC DE MEMBRANA, EN SU FORMA PURIFICADA, PRESENTA UN BAJO PESO MOLECULAR POR SOS-PAGE (18 KD) Y UN PI DE 8,4-9,3, MIENTRAS QUE EL ENZIMA PLC CITOPLASMATICO TIENE UN PESO MOLECULAR DE 50-60 KD Y UN PI DE 6,2. PROPIEDADES DE AMBAS ENZIMAS COMO DEPENDENCIA DE IONES, CA++ Y OTROS METALES, EFECTO DE QUELANTES, EFECTO DE DETERGENTES, PH OPTIMO Y ESTABILIDAD FRENTE A PH, Y ESPECIFICIDAD DE SUSTRATO SE DISCUTEN EN EL TRABAJO.