Implantes experimentales de aloinjertos arteriales criopreservados. Su validación como sustitutos vasculares

Abstract

Los avances en técnicas criogénicas, han permitido disponer de una nueva fuente de sustitutos arteriales: los vasos criopreservados. Los aloinjertos criopreservados, procedentes de Bancos de vasos, pueden ser una alternativa a implantes autólogos, cuando es necesaria una sustitución vascular. Existen todavía controversias sobre su viabilidad y la respuesta inmunológica que generan tras su implante. Ello nos ha llevado a realizar el presente estudio experimental con el fin de dilucidad algunos aspectos en relación con el proceso de lesión/reparación vascular. Para ello, se eligió, un modelo de injerto vascular en arteria ilíaca común de rata. Utilizamos ratas Lewis hembra como donantes y Fisher-344 como receptoras. Tras la extracción de arterias ilíacas de los donantes, la mitad de ellas fueron criopreservadas de manera gradual y controlada, en un congelador biológico, disminuyendo la temperatura 1ºC/min. A continuación fueron almacenadas a -145ºC, en vapores de N líquido durante 30 días. Después fueron sometidas a un proceso de descongelación lenta (aumentando la temperatura 1ºC/min). Las arterias ilíacas no criopreservadas o criopreservadas fueron implantadas en la arteria ilíaca común derecha, de las ratas receptoras. Se establecieron los siguientes grupos de estudio: Grupo control (dividido en dos subgrupos: arterias no criopreservadas y anterior criopreservadas sin implantar), Grupo I: injertos alogénicos y Grupo II: injertos alogénicos criopreservados. Los tiempos de estudio fueron: 14, 30, 90 y 180días post-implante. Los injertos fueron sometidos a exámenes morfológicos, morfométricos e inmunohistoquímicos. Tras el proceso de criopreservación y posterior descongelación, no se observó la formación de fracturas espontáneas ni graves alteraciones en la pared vascular de las arterias del grupo control. Tras el implante, el porcentaje de injertos permeables fue del 85,71% en el Grupo I y 82,14% en el Grupo II. El grado de dilatación de la luz vascular fue significativamente superior en los aloinjertos criopreservados respecto a los frescos a los 90 y los 180 días. En los aloinjertos del Grupo I el proceso reparativo se caracterizó, por la aparición de una mioíntima, con abundante presencia de células inflamatorias, inestabilidad endotelial, degeneración de la capa media nativa entre los 30 y los 90 días y formación de una neoadvencia proliferante (neoangiogénesis e intensa fibrosis). El injerto desencadenó una importante reacción inflamatoria con un pico máximo a los 90 días, mediada fundamentalmente por linfocitos T CD8 y monocitos/macrófagos. La muerte celular por apoptosis presentó una clara tendencia al aumento con el transcurso del tiempo del estudio. En el Grupo II, el proceso de remodelación vascular fue similar al observado en lo aloinjertos frescos, aunque la pérdida del componente celular en la capa media fue evidente a los 14 días. Los resultados avalan una aceleración del proceso de estabilización de la capa intimal, ya que se produjo precozmente la diferenciación hacia el fenotipo de célula muscular lisa estable. La respuesta inmune y el grado de fibrosis a nivel de la adventicia fue significativamente menor en todos los tiempos de estudio. No se observaron diferencia en la tasa de muerte celular respecto al grupo I. Las diferencias en el grosor total de la pared vascular de los dos grupos fueron estadísticamente significativas a partir de los 30 días debido al importante grado de fibrosis y la acusada reacción inflamatoria en la adventicia de los aloinjertos frescos. El protocolo de criopreservación/descongelación lenta utilizado en este estudio, disminuyó la respuesta inmune y mejoró el comportamiento de los aloinjertos arteriales.