Impact of the transient receptor potential vanilloid 1 deletion on the endocannabinoid system in the mouse dentate gyrus

Résumé

En este trabajo de tesis doctoral se ha analizado como la delección genética de un receptor afecta al resto del sistema con el que interactúa. Más concretamente, se ha establecido cuáles han sido los cambios en el sistema endocannabinoide del hipocampo, en la capa molecular del giro dentado, tras la eliminación completa del receptor TRPV1 (ratones TRPV1-KO).Se ha analizado tanto la expresión de las enzimas relacionadas con la síntesis y degradación de endocannabinoides, la expresión de proteínas relacionadas con la funcionalidad del receptor CB1R y la expresión del propio receptor CB1R mediante inmunohistoquimia y western blot. También se ha analizado la redistribución a nivel ultra-estructural del receptor CB1R en neuronas como en astrocitos y en orgánulos celulares como la mitocondria en los ratones TRPV1-KO. Junto con ello, se ha analizado la plasticidad a largo plazo que presentan estos ratones en la capa molecular del giro dentado, subdivido en las tres capas que lo conforman. Además, se ha evaluado la memoria tanto de reconocimiento como espacial de estos ratones para ver si los cambios observados a nivel de expresión y redistribución, así como los cambios observados en la plasticidad sináptica, podían tener repercusión en las funcionesnormalmente atribuidas al hipocampo.Por último, se ha evaluado si las alteraciones que presentan estos ratones podría tener alguna implicación en una situación patológica, en este caso se evaluó la respuesta de los TRPV1-KO frente a convulsiones producidas por kainato.Los cambios observados en cuanto a la expresión de proteínas relacionas con el sistema endocannabinoide (aumento en unas y descenso en otras), la expresión aumentada del receptor CB1 en neuronas glutamatergicas y reducida en gabaergicas, los cambios en la eficiencia de acoplamiento y los cambios en la plasticidad sináptica no afectaron a las memorias evaluadas de los ratones pero sí que supusieron un mejoramiento frente a las convulsiones producidas por el kainato. // En este trabajo de tesis doctoral se ha analizado como la delección genética de un receptor afecta al resto del sistema con el que interactúa. Más concretamente, se ha establecido cuáles han sido los cambios en el sistema endocannabinoide del hipocampo, en la capa molecular del giro dentado, tras la eliminación completa del receptor TRPV1 (ratones TRPV1-KO).Se ha analizado tanto la expresión de las enzimas relacionadas con la síntesis y degradación de endocannabinoides, la expresión de proteínas relacionadas con la funcionalidad del receptor CB1R y la expresión del propio receptor CB1R mediante inmunohistoquimia y western blot. También se ha analizado la redistribución a nivel ultra-estructural del receptor CB1R en neuronas como en astrocitos y en orgánulos celulares como la mitocondria en los ratones TRPV1-KO. Junto con ello, se ha analizado la plasticidad a largo plazo que presentan estos ratones en la capa molecular del giro dentado, subdivido en las tres capas que lo conforman. Además, se ha evaluado la memoria tanto de reconocimiento como espacial de estos ratones para ver si los cambios observados a nivel de expresión y redistribución, así como los cambios observados en la plasticidad sináptica, podían tener repercusión en las funcionesnormalmente atribuidas al hipocampo.Por último, se ha evaluado si las alteraciones que presentan estos ratones podría tener alguna implicación en una situación patológica, en este caso se evaluó la respuesta de los TRPV1-KO frente a convulsiones producidas por kainato.Los cambios observados en cuanto a la expresión de proteínas relacionas con el sistema endocannabinoide (aumento en unas y descenso en otras), la expresión aumentada del receptor CB1 en neuronas glutamatergicas y reducida en gabaergicas, los cambios en la eficiencia de acoplamiento y los cambios en la plasticidad sináptica no afectaron a las memorias evaluadas de los ratones pero sí que supusieron un mejoramiento frente a las convulsiones producidas por el kainato.