Bases moleculares de la actividad antitumoral de nuevos agentes terapéuticos derivados de la hispanolona

Resumen

Los productos naturales desempeñan un papel fundamental en la búsqueda de nuevos agentes bioactivos en numerosas áreas terapéuticas, entre las que destaca el cáncer. En este trabajo nos hemos centrado en la evaluación del potencial antitumoral de un diterpeno labdánico derivado de la hispanolona, alfa-Hispanolol (alfa-H), frente a glioblastoma, uno de los tumores más letales del sistema nervioso central. Los resultados obtenidos muestran que alfa-H ejerce efectos citotóxicos en las líneas celulares de glioblastoma humano U87 y U373, de forma concentración- y tiempo-dependiente, sin alterar la supervivencia de las células no tumorales. Además, inhibe el crecimiento tumoral en un modelo in vivo, no habiéndose observado signos aparentes de toxicidad. También hemos descrito que el mecanismo a través del cual alfa-H induce la muerte de las células, implica la puesta en marcha de vías de señalización apoptóticas. Así, el tratamiento con el diterpeno altera el ciclo celular con un aumento significativo del número de células que se encuentran en apoptosis, y provoca cambios morfológicos característicos de este proceso. Nuestros datos han confirmado la implicación de la vía extrínseca e intrínseca, tal y como lo demuestra la activación de las caspasas 8, 9 y 3, la disminución de la expresión de proteínas antiapoptóticas (Bcl-2 y Bcl-xL) y el aumento de la expresión de proteínas proapoptóticas (Bax y Bid). Por otro lado, hemos comprobado que alfa-H inhibe la migración e invasión de las células de glioblastoma a través de la regulación de la actividad y los niveles de las MMPs y sus inhibidores. De hecho, en presencia de alfa-H se observa una disminución de los niveles de MMP-2 y MMP-9 y un aumento del inhibidor TIMP-1. Estos cambios parecen estar asociados con una menor activación de la vía de señalización de p38 MAPK, y un aumento en la expresión de miR-16. La inducción de apoptosis, la disminución de la proliferación celular, la regulación de las MMPs y sus inhibidores, así como de la expresión de p-p38 MAPK y miR-16 se han confirmado en un modelo de xenotrasplante en ratón. Por otra parte, hemos descrito el efecto modulador de este compuesto sobre el microambiente tumoral, a través de la regulación de los macrófagos. Los experimentos in vivo han demostrado que en presencia del diterpeno, los tumores presentan menos infiltración de macrófagos en la proximidad de los vasos sanguíneos, así como un menor número de macrófagos con fenotipo M2 o TAM, lo que conduce a un defecto generalizado en el proceso de angiogénesis, facilitando la regresión del tumor. Este efecto parece deberse a la capacidad del diterpeno de revertir la activación de los macrófagos desde un fenotipo protumoral o M2, hacia un fenotipo antitumoral o M1. En definitiva, los resultados obtenidos en este trabajo confirman el potencial antitumoral de alfa-H frente al glioblastoma y sugieren que este compuesto podría ser considerado como una nueva estrategia terapéutica en el tratamiento de este tumor.