Evaluación del impacto del “Precondicionamiento regenerativo” en el perfil molecular y energético del síndrome de “Small-For-Flow” en un modelo porcino

Resumen

Actualmente, los límites de la cirugía hepática están establecidos por la posibilidad de desarrollar insuficiencia hepática. Esto impide, intervenir a pacientes para los que la cirugía hepática es el único tratamiento potencialmente curativo. A día de hoy, se llevan a cabo distintas estrategias para aumentar el volumen del futuro remanente. Nuestro grupo evalúa de forma experimental una estrategia diferente, el "Precondicionamiento regenerativo". Se trata de una técnica de estimulación hepatocitaria, que consiste en una ligadura o embolización portal, seguida de una hepatectomía precoz, de 1 a 4 días después. Estudios previos sobre esta técnica han demostrado resultados favorables en modelos animales, obteniendo mejorías en la función hepática y en la tolerancia al hiperaflujo portal que tiene lugar tras resecciones extendidas, conocido como síndrome de "Small-For-Flow". La regeneración hepática es un proceso complejo que implica numerosas vías celulares y moleculares. Entender el papel del "Precondicionamiento regenerativo" en este proceso es un paso más en el conocimiento del síndrome de "Small-For-Flow". Los objetivos de nuestro estudio fueron: describir el perfil molecular y energético del Síndrome de "Small-For-Flow" en un modelo porcino; y evaluar la influencia del "Precondicionamiento regenerativo" en el perfil molecular y energético de este síndrome. Para ello realizamos un estudio experimental en un modelo porcino de "Small-for-Flow". Se estudiaron dos grupos de diez cerdos que fueron sometidos a una hepatectomía subtotal (90%). Los animales del grupo experimental, fueron tratados con "Precondicionamiento regenerativo" mediante embolización portal 24 horas antes de la hepatectomía. Al grupo control no se le realizó embolización.Antes del procedimiento, tras la resección, y las 24 horas se analizaron los siguientes parámetros: TNF-¿, MCP-1, IL-1, IL-10, iNOS y eNOS mediante la PCR-RT; TNF-¿, MCP-1, IL-1, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, eNOS, iNOS, Caspasa-3 y Caspasa-3-activada mediante Western Blot; y el metabolismo energético (ATP, ADP y AMP) mediante espectrofotometría. En el análisis estadístico se utilizó el programa SPSS. Para el análisis de los datos se utilizó el modelo lineal mixto. Los resultados de nuestro estudio muestran que el síndrome de "Small-For-Flow" provocó un aumento en los valores de las citocinas proinflamatorias: TNF-¿, MCP-1, IL-1 e IL-8. Los animales sometidos al "Precondicionamiento" no mostraron dicho aumento. La expresión de la IL-5 y de la IL-6 no mostró cambios significativos a lo largo del procedimiento, en ninguno de los grupos. Los valores de las citocinas antiinflamatorias, la IL-4 y la IL-10 disminuyeron de forma significativa a las 24 horas de la hepatectomía en ambos grupos, sin diferencias entre los dos grupos. No se encontraron diferencias respecto a la expresión de la Caspasa-3 en su forma inactiva. Los valores de la Caspasa-3-activada aumentaron de forma significativa en los animales del grupo control. El grupo control no asoció dicho aumento. El síndrome de "Small-For-Flow" se asoció una disminución de la eNOS, que no se objetivó en el grupo experimental. En nuestro estudio no encontramos diferencias respecto a la expresión de la iNOS en ambos grupos. En el grupo control se observó una disminución del ATP y un aumento del ADP y el AMP, lo que llevó a un menor ratio ATP:ADP y menor carga energética. El "Precondicionamiento" se asoció a un menor descenso del ATP, y a un menor ascenso de los valores de ADP y AMP, consiguiendo un mayor ratio ATP:ADP y una mayor carga energética. En conclusión, el síndrome de "Small-For-Flow" se asocia a nivel molecular con un estado proinflamatorio, un aumento de la apoptosis, una disminución de la óxido nítrico sintasa y una disminución de la carga energética. El "Precondicionamiento regenerativo" se asocia a una menor respuesta inflamatoria y apoptótica, a un aumento de la óxido nítrico sintasa y a una mayor carga energética.