Participación de las proneurotrofinas y sus receptores en la degeneración retiniana en modelos murinos de retinosis pigmentaria

Resumen

La Retinosis Pigmentaria (RP) es un término que engloba un grupo heterogéneo de distrofias hereditarias de la retina, para las que actualmente no existe una terapia efectiva. Aunque existen más de 300 mutaciones relacionadas con RP, la mayoría de los casos comparten una muerte patológica y progresiva de los fotorreceptores relacionada directamente con la pérdida de visión. Por ello, los tratamientos independientes del tipo de mutación que subyace a la degeneración visual, pero capaces de proteger a los fotorreceptores, aunque sean solo remedios paliativos, son posibilidades terapéuticas atractivas que se están intentando desarrollar activamente. Las proneurotrofinas son las formas precursoras de las neurotrofinas que inducen, generalmente, efectos biológicos opuestos a sus formas maduras, mediante la unión a complejos receptores también distintos. La señalización del precursor del factor de crecimiento neural (NGF), el proNGF, a través del receptor de neurotrofinas p75 (p75NTR), ha sido asociada con diferentes trastornos neurodegenerativos. Diversos modelos de degeneración retiniana presentan una respuesta proinflamatoria mediada por el proNGF. La RP comparte con estas patologías de la retina numerosas características del proceso degenerativo, así como la existencia de un marcado componente inflamatorio. Sin embargo, la participación del este eje proNGF/p75NTR en la progresión de esta enfermedad no ha sido descrita con claridad. Nuestro trabajo se inicia con el objetivo de profundizar en el conocimiento de los mecanismos celulares y moleculares implicados en el desequilibrio inflamatorio que tiene lugar en las retinas afectadas con RP, profundizando en la implicación del eje proNGF-p75NTR en esta patología, así como el potencial neuroprotector de interferir en el mismo, con la intención de definir nuevas dianas terapéuticas. Para el bloqueo de la señalización proNGF/p75NTR se emplearon diversos antagonistas de p75NTR. El efecto neuroprotector de bloquear p75NTR se evaluó en dos modelos distintos de RP: los ratones rd10 y RhoP. Los estudios ex vivo se realizaron en cultivos organotípicos de retinas, mientras que los estudios in vivo se realizaron mediante inyección intravítrea y subconjuntival, evaluándose el efecto neuroprotector a nivel histológico, celular y molecular, así como a nivel funcional mediante electroretinograma (ERG). Los niveles de proNGF sin procesar se encuentran incrementados en la retina distrófica con respecto al WT desde los estadios más tempranos de la degeneración, antes del pico de muerte de los fotorreceptores, manteniéndose elevados a lo largo de todo el periodo de pérdida de los mismos. Los niveles del transcrito, en cambio, se mantienen relativamente estables en ambas estirpes. La acumulación de proNGF en la retina del ratón rd10 coincide con una elevada expresión de ¿2M, una proteína capaz de inhibir el procesamiento de dicho precursor y potenciar su señalización. Explantes de retina tratados con antagonistas de p75NTR mostraron un descenso significativo de la muerte de los fotorreceptores, así como la preservación del grosor de la capa donde se localizan sus núcleos. Este efecto estuvo acompañado de un descenso en la gliosis reactiva, la microgliosis y la secreción de TNF¿. El empleo del antagonista THX-B (1,3-diisopropil-1-[2-(1,3-dimetil-2,6-dioxo-1,2,3,6-tetrahidropurin-7-il)-acetil]-urea) in vivo en los modelos murinos rd10 y RhoP, mediante una única inyección intravítrea o subconjuntival, consiguió ejercer neuroprotección sobre los fotorreceptores, preservando la morfología y la función visual. Estos resultados indican la implicación del eje proNGF/p75NTR en la progresión de RP y sugieren que el bloqueo de la señalización proNGF/p75NTR podría suponer una diana terapéutica independiente a la etiología de la enfermedad.