Células linfoides innatas en el contexto de la alorrespuesta inmune en trasplante de órgano sólido

Resumen

El trasplante de órgano sólido (TOS) es el mejor tratamiento para los pacientes con disfunción terminal de un órgano. Sin embargo, la supervivencia del injerto a largo plazo sigue estando limitada por la respuesta inmunológica a pesar de los protocolos actuales de inmunosupresión focalizados en el control del linfocito T y B. Otros compartimentos distintos de la respuesta inmune adaptativa, como las células linfoides innatas (ILC), podrían estar contribuyendo en la alorrespuesta del injerto. El objetivo de la presente Tesis es profundizar en la caracterización fenotípica y funcional de las ILC helper (hILC) a nivel local y periférico en el contexto de diferentes TOS (TxR, TxH y TxI) así como identificar los mecanismos moleculares que podrían explicar la aparente resistencia de este tipo celular a los fármacos inmunosupresores. En el análisis de las hILC a nivel local en una cohorte de TxI (N=9) se observó que los injertos intestinales de avanzada evolución posTx (3-13 años posTx) (N=8) presentaron una proporción significativamente mayor de hILC que los intestinos nativos tanto en epitelio intestinal (IEp) como en lamina propria (LP) hasta los 10 años posTx, cuando recuperan los niveles normales. Además, se identificó un desequilibrio de los subtipos de hILC representado por un aumento de las ILC1 y una reducción de las ILC3 delimitado en el compartimento epitelial y persistente a lo largo del tiempo posTx. En concordancia con estos hallazgos, el paciente monitorizado en el posTx temprano mostró un aumento de la representación de las hILC en detrimento de una reducción marcada de las células linaje positivas (Lin+) (LT y LB) así como una expansión de las ILC1 en IEp y LP asociado a episodios de rechazo e infecciones. En relación al origen de las hILC, detectamos la presencia de células del donante hasta 13 años posTx siendo el quimerismo de las hILC significativamente menor que en las células Lin+ y en las células NK. El paciente monitorizado mostró una repoblación de las hILC del receptor más temprana y más rápida que en las células Lin+. El estudio de las hILC en una cohorte de TxR (N=101) y TxH (N=21) validó la persistencia de las hILC a nivel periférico a pesar de la terapia inmunosupresora. Los pacientes no presentaron diferencias en las hILC ni sus subtipos a nivel numérico ni funcional a 14 días posTx respecto al pre-trasplante y a los controles. Estratificando a los pacientes en función de la terapia de inducción recibida observamos que los números absolutos de hILC y sus subtipos de los pacientes a 14 días posTx seguían siendo comparables con el grupo control independientemente de si habían recibido timoglobulina, basiliximab o no inducción. El análisis de la expresión de las dianas moleculares de los diferentes fármacos inmunosupresores en las hILC reveló una baja unión de la timoglobulina, una expresión reducida de CD25 (diana del basiliximab) así como una actividad de la calcineurina disminuida con indetectable expresión de calcineurina y FKBP12 (dianas del tacrolimus). Por tanto, la persistencia de las hILC tanto a nivel de injerto en TxI como periférico en el TxR y TxH resulta indicativa de la resistencia de las hILC a la terapia inmunosupresora, que podría explicarse por la reducción o ausencia de expresión de las dianas de los fármacos inmunosupresores en las hILC. Además, el análisis de la distribución y el quimerismo de las hILC en el conjunto de la mucosa intestinal han aportado potenciales biomarcadores relacionados con la estabilidad del injerto a largo plazo (normalización de las frecuencias de las poblaciones linfoides en IEp y LP) y con el rechazo (desequilibrio ILC1/ILC3 en la LP).