Estudio de marcadores genéticos e inmunitarios relacionados con inmunoterapia en cáncer gástrico

Resumen

El cáncer es una patología que implica la transformación maligna de células, que adquieren una serie de características, como son el mantenimiento de la señalización proliferativa, evasión de los supresores del crecimiento, la resistencia a la muerte celular, adquisición de inmortalidad replicativa, inducción de la angiogénesis y la activación de la invasión y metástasis, inestabilidad genómica y ambiente proinflamatorio, desregulación metabólica y, finalmente, la evasión de la respuesta inmunitaria anti-tumoral. El cáncer gástrico es el quinto tipo de tumor más frecuente en la población mundial, con más de un millón de muertes anuales en todo el mundo. Es uno de los tumores con mayor prevalencia de mutaciones somáticas, lo que facilita la formación de neo-antígenos tumorales y hace susceptible estos tumores para su tratamiento con diversos tipos de inmunoterapia. La inmunoterapia comprende una serie de tratamientos que promueven la estimulación del sistema inmunitario tendentes a la prevención o tratamiento de una enfermedad. En este estudio, nos propusimos obtener biomarcadores relacionados con el sistema inmunitario y la inmunoterapia en el cáncer gástrico. Estos biomarcadores consistieron en 1) la determinación de Polimorfismos del gen TGFB1 relacionadas con la expresión de TGF-ß1, 2) la determinación de amplificaciones genéticas del gen HER2 en pacientes con cáncer gástrico mediante técnicas de biología molecular y 3) la determinación de poblaciones linfocitarias en sangre periférica y tejido de pacientes con cáncer gástrico y la expresión de las moléculas PD1 y PDL1. Los resultados obtenidos en este estudio muestran que: Polimorfismos de TGFB1: Encontramos un aumento en la frecuencia del genotipo rs1800471-G/C en los pacientes con cáncer gástrico y un aumento significativo de las variantes rs1800468-G/A, rs1800469-C/C y el haplotipo rs1800468-A/rs1800469-C/rs1800470-T/rs1800471/G en pacientes con enfermedad diseminada, relacionadas con una elevada expresión de TGF-ß1. Los pacientes portadores de los genotipos o el haplotipo de riesgo presentaban una menor supervivencia a 5 años que los pacientes con las variantes alternativas. En plasma, encontramos una menor expresión de TGF-ß1 en pacientes con una supervivencia menor a 5 años. Amplificaciones de HER2: Las técnicas de PCR diferencial (dPCR) y PCR cuantitativa (qPCR) identificaron la presencia de amplificaciones somáticas de HER2 en el 25% de los pacientes en ADN procedente de tejido tumoral, y nunca en el tejido distal de esos mismos pacientes. Detectamos mediante inmunohistoquímica e inmunofluorescencia la presencia de HER2 en el tejido tumoral (y no en el distal) de los pacientes previamente identificados como HER2+ mediante dPCR y qPCR. Análisis de poblaciones linfocitarias, PD1 y PDL1: Encontramos un aumento significativo de células PD1+ en linfocitos de sangre periférica de los pacientes con respecto a controles, siendo este incremento mayor en las células CD8+. Empleando técnicas de inmunohistoquímica, confirmamos un aumento de células CD8+ y PD1+ en tejido tumoral comparado con el tejido distal de estos pacientes, así como la expresión de PDL1 en parte de estos pacientes. Se halló la presencia de estructuras linfoides terciaras (TLS) presentes en los tejidos tumoral y distal de pacientes con cáncer gástrico. En conjunto, este estudio concluye que 1) los polimorfismos del gen TGFB1 y la expresión de TGF-ß1 podrían emplearse como marcadores pronósticos en pacientes con adenocarcinoma gástrico 2) las técnicas basadas en biología molecular pueden ser una buena herramienta complementaria para la identificación de amplificaciones de HER2 y 3) Los pacientes con cáncer gástrico presentan una alta infiltración de células CD8+ y PD1+, estructuras linfoides terciarias y, parte de ellos, una alta expresión de PDL1. los marcadores aquí estudiados podrían servir como método para identificar pacientes susceptibles de beneficiarse de las terapias anti PD1/PDL1.