Potencial diagnóstico y terapéutico de los receptores nucleares LXR en la enfermedad inflamatoria intestinal

Resumen

Introducción. el término enfermedad inflamatoria intestinal(EII) engloba un conjunto de entidades que se caracterizan por la inflamación crónica del intestino. El receptor nuclear Liver X Receptor (LXR) ha mostrado una acción antiinflamatoria en macrófagos en cultivo. Sin embargo, su relevancia en la fisiología epitelial y en la patogenia de la EII no está estblecida.Hipótesis. La vía de señalización LXR-ABCA1 tiene un papel antiinflamatorio en el epitelio del colon y la expresión epitelial de LXR puede estar modificada en la EII. Materiales y Métodos. Se incluyeron biopsias endoscópicas de mucosa inflamada y endoscópicamente indemne de pacientes con EII, así como controles sanos.Se evaluó la inflamación endoscópica, histológica, la actividad clínica, así como la presencia de LXR por medio de western blot e inminohistoquímica (IHQ). Se utilizaron los ratones IL-10-/- como modelo de ileocolitis crónica, así como ratones salvajes de la misma edad. Se valoró la expresión en el colon de moléculas proinflamtorias y estructurales así como LXR¿ß LXR¿ y LXRß y sus genes diana por reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (qPCR) inmunofluorescencia (IF) e IHQ. Se usaron células Caco-2.Se valoró la expresión de LXR sus genes diana de IL-8 y CCL-28 por medio de qPCR o ELISA. Se usó el agonista de LXR GW3965 y el antagonista de ABCA1 glibenclamida.La valoración del paso de p65 de NF-¿B al núcleo se valoró por IF y la de la fosforilación de MAP quinasas p44-42 y de AKT por western blot. Resultados. Se incluyeron 17 pacientes con EII y 5 controlos. La presencia de LXR por western blot fue menor en los pacientes con EII con respecto a los sujetos control.El número de núcleos positivos para LXR¿ß en el epitelio intestinal de los segmentos inflamados es menor que en los endoscópicamente indemnes, mientras que los pacientes control presentaron niveles aún superiores.Este contaje en el segmento indenme se correlacionó negativamente con el valor del índice de Mayo, mientras que el del segmento inflamado se correlacionó negativamente con la edad y el índice histológico de inflamación. En el colon de los ratones IL¿10¿/¿ los niveles de expresión de LXR¿ y ß y los de sus genes diana son menores que en el del ratón salvaje.La cuantificación de los núcleos positivos para LXR¿ß en el colon en menor en ratones IL¿10¿/¿ y este descenso es secundario a una menor positividad epitelial y de LXRß.La estimulación de las células Caco-2 con interleucina(IL) 1ß condicionó un aumento de IL-8 y CCL-28 y descenso de ABCA1 ,mientras que la expresión génica de LXR¿ y ß no cambió.El tratamiento con GW3965 aumentó la expresión de ABCA1.El GW3965 disminuyó la expresión IL-8 y CCL-28 que acontece en respuesta a IL¿1ß.La glibenclamida contrarresta el efecto del GW3965 sobre la fosforilación de p44-42 en células Caco-2 estimuladas con IL¿1ß así como atenúa el descenso de la fosforilación AKT en esas condiciones.Conclusiones.El receptor LXR puede jugar un pael relevante en la patogenia de la EII como pone de manifiesto su emnor expresión génica y prteica en el colon de pacientes con dicha enfermedad.Tnato la expresión génica como la función de LXR en el colon de ratones IL-10¿/¿ están disminuidas.La activación farmacológica en células Caco-2 en cultivo estimuladas con IL-1ß por lo que LXR puede constituir una nueva diana terapéutica en la EII.Las vías efectoras de NF-¿B y MAP quinasas son las responsables de dicho efecto antiinflamatorio.Se ha identificado ABCA1 como una molécula clave en la acción antiinflamatoria y antiproliferativa de la vía de LXR