Efectos de la Ciclosporina-A vs excipiente, sobre un modelo experimental de autoinjerto arterial. Implicaciones en el proceso reparativo

Resumen

dentro del proceso reparativo arterial que sigue a la lesión total o parcial de la pared vascular, la aparición de la hiperplasia intimal (neoíntima), constituye uno de los hechos más relevantes. Este proceso, que consiste en la proliferación de células musculares lisas y síntesis de matriz extracelular a nivel subintimal, causa con frecuencia estenosis y trombosis del vaso, y conduce al fracaso del mismo. Los linfocitos T están implicados en al aparición de la neoíntima como agentes productores o inductores de la génesis de factores mitogénicos para células musculares lisas y otras estirpes celulares. Nuestro objetivo fue comprobar si la inmunosupresión podía inhibir el desarrollo de la hiperplasia intimal, en un modelo experimental de autoinjerto arterial desarrollado en rata Spargue-Dawley hembra, utilizando como agente inmunosupresor la Ciclosporina-A (CsA). El estudio se planteó en dos pautas diferentes: A,- preoperatoria, administrando la CsA durante 4 días previos a la intervención quirúrgica. B,- contínua, iniciando el tratamiento el mismo día que en el caso anterior y continuándolo hasta el sacrificio a 7,14,21,30 y 50 días post-implante. Diseñamos tres grupos de estudio: Grupo I (control, n=20), animales intervenidos y sin tratamiento Grupo II (CsA-Cp, n=40), animales intervenidos y tratados con Sandimun(r) (CsA vehiculizada en un agente oleaginoso, Cremophor(r)) en una dosis de 5 mg/Kg/día, vías s.c. Grupo III (CsA-Et, n=40), animales intervenidos y tratados con CsA pura, utilizando etanol como excipiente. Se realizaron estudios morfológico y ultraestructural (microscopía óptica y electrónica de transmisión y barrido), de proliferación celular (autorradiográfia con timidina-H3), inmunohistoquímico (anticuerpos específicos para linfocitos T CD4+ y CD8+, monocitos/macrófago ED1+, alfa-actina de músculo liso, factor von Willebrand (WF), elastina, elastasa neutrofílica y metaloproteinasa-2, -MMP-2-), hibridación in situ (sonda ARN-tropolelastina), morfométricos (espesor de las capas media y enoíntima, y nº de células marcadas con timidina-H3) y estadístico (tests de "U" de Mann-Whitney y Student Newman-Keuls, respectivamente). En el grupo control, la hiperplasia intima se desarrolló sobre el injerto a los 14 días del implante, con presencia de células musculares lisas, escasa participación de linfocitos T y macrófagos, y formación de un nuevo endotelio WF+, que expresaba transcritos para tropoelastina a los 50 días. Sin embargo no se observó formación de láminas elásticas en dicha capa. En los animales tratados con CsA (en cualquiera de las dos formulaciones y pautas), tanto la hiperplasia de la íntima, como la reendotelización del segmento injertado, se retrasaron significativamente (p<0,05) con respecto a los controles (hasta dos semanas). La pared arterial adquirió, desde los primeros estadios del estudio, caracteres aterogénicos como infiltración lipídica, adhesión e infiltración de células blancas, pérdida de células musculares lisas, degradación de las láminas elásticas (relacionada con la presencia de neutrófilos y enzimas proteolíticas, -elastasa y MMP-2) y notable adelgazamiento (p<0,05) de la capa media del injerto. A los 50 días el endotelio (WF+) también expresaba transcritos para tropoelastina, y tampoco se observó la formación de láminas elásticas en la neoíntima. Estos resultados indican que el fármaco es tóxico para las células de la pared de injerto e induce cambios aterogénicos en la capa media del vaso dañado. Sugiriendo que la CsA retrasa, pero no inhibe, la aparición de la hiperplasia intimal en el modelo de autoinjerto en rata, y que este efecto es ejercido por un mecanismo independiente de la supresión de la respuesta inmune.