Estudio de la regulacion de la traduccion en la apoptosis inducida por taxol en celulas eucariotas

Resumen

La síntesis de proteínas es un proceso que realiza la célula para producir todas las proteínas que necesita en el desarrollo de sus funciones. Dicho mecanismo se divide en tres etapas iniciación, elongación y terminación. Por otro lado, la apoptosis es un mecanismo de muerte celular programada que se desencadena en la célula a través de un proceso selectivo y ordenado, sin producir residuos que comprometan la supervivencia de las células vecinas. Está descrita la relación que existe entre el mecanismo de apoptosis y el de traducción; por un lado, en determinadas situaciones en las que se desencadena una respuesta apoptótica, la síntesis de proteínas se encentra inhibida y, por otro, determinadas proteínas implicadas en la respuesta apoptótica están reguladas traduccionalmente. Es necesario realizar un mayor esfuerzo para alcanzar una mejor comprensión de dicha relación entre ambos procesos. En este trabajo se ha utilizado taxol (paclitaxel), el cual es un potente agente antineoplásico que detiene el ciclo celular en fase G2/M y es capaz desencadenar diversos mecanismos de apoptosis en diferentes líneas celulares. Considerando estos aspectos y para estudiar la situación de la maquinaria traduccional nos planteamos utilizar el taxol como inductor de apoptosis en dos líneas celulares, NIH3T3 (fibroblasto de ratón) y HEK293T (células embrionarias de riñón humano)Observamos que, efectivamente, el taxol era capaz de desencadenar una respuesta apoptótica y una fuerte, aunque incompleta, inhibición de la síntesis global de proteínas. Observamos que la apoptosis desencadenada en HEK293T esta mediada por la caspasa 3 mientras que en las NIH3T3 dicho mecanismo esta regulado por la calpaína. Por otro lado, nos centramos en el estudio de los factores de iniciación de la traducción y del factor de elongación eef2 para explicar la inhibición de la síntesis global de proteínas que observamos en ambos modelos y pudimos constatar que la fosforilación del eef2, en NIH3T3, y la disminución de la cantidad de eef2, en HEK¿93T, podrían explicar la disminución de l síntesis global de proteínas. Por ultimo, realizamos el estudio de la traducción dependiente de IRES (una forma alternativa a la iniciación de la síntesis de proteínas dependiente de cap) en el modelo de HEK293T. De esta forma, pudimos comprobar que c-myc es una proteína que se sobreexpresa en el tratamiento con taxol y que el aumento de la cantidad de dicha proteína estaba regulado traduccionalmente de una manera dependiente de IRES.