Caracterización de la proliferación y viabilidad de la células B de la LLC-B. Análisis de factores implicados en su regulación

Resumen

Del estudio realizado sobre las células B purificadas de sangre periférica de pacientes con LLC-B se deducen las siguientes conclusiones: 1) La respuesta proliferativa de las células B es heterogénea. Se identifica de forma mayoritaria un estado de refractariedad al estímulo blastogénico dado por ligandos de inmunoglobulinas y/o esteres del forbol. De forma ocasional la asociación de ambas señales es capaz de inducir una blastogénesis relevante. 2) La concentración celular en el cultivo es una variable que determina la respuesta proliferativa a señales mitogénicas en una proporción relevante de pacientes, 69%. Este efecto de la concentración celular esta mediado, al menos en parte, por la secreción de factores solubles. El heterogéneo efecto de la concentración celular entre los clones leucemios analizados no esta asociado con las variables clínicas analizadas. 3) La muerte celular en los cultivos de células leucémicas no depende únicamente del fenómeno de apoptosis. Asimismo, la muerte por apoptosis no esta asociada a la producción de radicales de oxigeno. 4)Las células B tienen una reducida capacidad de moviliar Ca 2+ en respuesta a ligandos de inmunoglobulinas, que no correlaciona con el estadio, las características clínicas de los pacientes, el perfil fenotípico, la capacidad blastogencia, la viabilidad ni la apoptosis celular. 5) en condiciones basales la expresión intracitoplasmática de TNF-alfa, IFN-gamma, IL-6 o IL-10 es heterogénea entre los pacientes. De forma mayoritaria únicamente un bajo porcentaje de las células expresan niveles detectables de las mencionadas proteínas, sin embargo, de forma aislada se puede encontrar un amplia expresión de TNF-alfa o de IL-6. La estimulación con ligandos de inmunoglobulinas o estimuladores de la proteína quinas C inducen la producción de TNF-alfa e IL-l intracitoplasmática en un porcentaje mayor del 50% de los casos estudiados. La ausencia o muy limitada detección basal de células que expresen a nivel proteico las citoquinas referidas también se asocia a su falta a nivel de ARNm. 6) La detección de ARNm de c-myc en las células ex vivo y su modulación por estímulos policlonales tras cultivo in vitro indica que no son linfocitos inertes in vivo y que son sensibles a la acción moduladora de señales activadoras de células B.