Purificacion y caracterizacion de alfa-galactosidasa en relacion al estudio de la secrecion de proteinas de aspergillus nidulans

Résumé

El trabajo presentado se enmarca dentro del estudio de secrecion de proteinas en hongos filamentosos. En este sentido se utiliza como modelo de proteina de secrecion la enzima alfa-galactosidasa de aspergillus nidulans (2.3) y se han llevado a cabo los siguientes objetivos: 1.- estudio de la produccion y distribucion de alfa-galactosidasa en diferentes medios de cultivo. 2.- purificacion y caracterizacion cinetica y fisico-quimica de alfa-galactosidasa presente en el caldo de cultivo y fraccion soluble del micelio de a. Nidulans (2.3). 3.- produccion de anticuerpos policlonales frente a la enzima alfa-galactosidasa de ambas procedencias. 4.- efecto de tunicamicina sobre la secrecion y actividad de alfa-galactosidasa de a. Nidulans. La enzima alfa-galactosidasa es una glicoproteina multimerica formada por cuatro monomeros de 87.000 d, localizada en la periferia celular. Presenta gran afinidad por el sustrato (rafinosa, melibiosa y pnpg).